[发明专利]一种脱二氧喹烯酮半抗原及其制备方法和其应用

权利要求书

1.一种脱二氧喹烯酮半抗原，具有式Ⅰ所示的化学结构：

2.权利要求1所述半抗原的制备方法，包括下述步骤（1）和（2）：

（1）将乙酰甲喹和低亚硫酸钠于60℃反应2小时，即得3-甲基-2-乙酰喹噁啉；所述乙酰甲喹和低亚硫酸钠的摩尔比为1:1.8；

（2）将3-甲基-2-乙酰喹噁啉和对甲酰苯甲酸在碱催化剂作用下，于40℃反应12h，再室温反应过夜，即得脱二氧喹烯酮半抗原；所述3-甲基-2-乙酰喹噁啉和对甲酰苯甲酸的摩尔比为1:1.2。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，所述反应在溶剂中进行，所述溶剂为四氢呋喃、100%乙醇和蒸馏水的混合溶剂，所述四氢呋喃、100%乙醇和蒸馏水的体积比为2:10:1；所述步骤（2）中，所述反应在溶剂中进行，所述溶剂为四氢呋喃、乙醇和水的混合物；所述步骤（2）中，所述碱催化剂为氢氧化钠。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，所述反应完毕后还包括浓缩过程和纯化过程。

5.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，所述反应完毕后还包括纯化过程。

6.权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原作为半抗原的用途。

7.权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原在检测脱二氧喹烯酮中的用途；

或，权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原在制备检测脱二氧喹烯酮产品中的用途。

8.一种抗原，为权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原与牛血清白蛋白的偶联物。

9.一种多克隆抗体，所述多克隆抗体是将权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原与牛血清蛋白的偶联物作为抗原免疫动物后获得的。

10.一种特异性检测脱二氧喹烯酮的试剂盒，所述试剂盒包括下述1）-9）：

1）碳酸盐缓冲液：

Na₂CO₃            1.59g/L

NaHCO₃            2.93g/L

溶剂为蒸馏水；

2）将权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原与卵清蛋白的偶联物作为包被抗原；

3）封闭液：

小牛血清           50ml/L

蔗糖               50g/L

酪蛋白             2.5g/L

Na₂HPO₄·12H₂O     5.8g/L

NaH₂PO₄·2H₂O      0.593g/L

Proclin300         300μl/L

溶剂为蒸馏水；

4）磷酸盐缓冲液：

Na₂HPO₄.12H₂O       3.12g/L

NaH₂PO₄.2H₂O        1.76g/L

溶剂为蒸馏水；

5）HRP-羊抗兔IgG；

6）底物缓冲液：

Na₂HPO₄.12H₂O          36.8g/L

柠檬酸                 9.33g/L

溶剂为蒸馏水；

7）3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液：

TMB                           96.15mg/L

乙二醇                        38.46mL/L

质量分数为30%的过氧化氢       961μL/L

Na₂HPO₄.12H₂O                 35.4g/L

柠檬酸                        8.97g/L

溶剂为蒸馏水；

8）H₂SO₄溶液：

质量分数为98%的浓硫酸        2mol/L

溶剂为蒸馏水；

9）将权利要求1所述脱二氧喹烯酮半抗原或由权利要求2-5任意所述方法直接得到的脱二氧喹烯酮半抗原与牛血清蛋白的偶联物作为抗原免疫动物后获得的多克隆抗体。