[发明专利]利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物含量的方法

权利要求书

1.一种利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 取家蚕血淋巴进行提取，获得供试样品溶液；

(2) 配制一系列不同浓度的阿苯达唑及其代谢物的混合标准溶液，分别注入超快速液相色谱仪，进行分离分析，并用三重四级杆质谱仪检测物质离子信号，获得阿苯达唑及其代谢物的标准分析数据；

(3) 按步骤(2)方法，取步骤(1)中的供试样品溶液注入超快速液相色谱仪，进行分离分析，并用三重四级杆质谱仪检测物质信号，获得供试样品的分析数据；

(4) 将步骤(3)获得的供试样品的分析数据与阿苯达唑及代谢物的色谱分析数据进行比对，即可对家蚕血淋巴中阿苯达唑及其代谢物进行定性和定量。

2.根据权利要求1所述的利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，所述步骤(1)的具体操作为：取家蚕血淋巴在提取前进行涡旋振荡处理，在涡旋振荡处理后，以乙腈和乙酸乙酯的混合液为提取液，按家蚕血淋巴与提取液体积比为1︰5~1︰8进行混合，涡旋振荡3~10 min，然后通过离心分离上清液，采用上述方法对残渣重复提取一次，合并上清液，离心、过滤，获得供试样品溶液。

3.根据权利要求1所述的利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，所述步骤(2)和(3)中超快速液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱：Agilent ZORBAX C18，4.6×100 mm，3.0 μm；柱温40℃；流动相：乙腈︰0.005 mol/L甲酸=80%︰20%~ 90%︰10%，等梯度洗脱；进样量10 μL；流速0.1000~0.2 000 mL/min。

4.根据权利要求1所述的利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，所述步骤(2)和(3)中三重四级杆质谱仪检测条件为：电离方式：ESI（+）；多重反应监测质谱扫描模式；雾化气：6.00~8.00 psi，气帘气23.00~26.00 psi，碰撞气：3.00~6.00 psi，离子化温度：500.00~600.00℃，喷雾电压：5000.00~6000.00 V，射入电压：8.00~12.00 V，碰撞室射出电压：8.00~12.00 V。

5.根据权利要求1所述的利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，所述步骤(2)的一系列不同浓度的阿苯达唑及其代谢物混合标准溶液分别为阿苯达唑及其代谢物浓度为5 μg/L、62.5 μg/L、125 μg/L、250 μg/L、625 μg/L和1 250 μg/L的阿苯达唑及其代谢物混合标准溶液。

6.根据权利要求1所述的利用超快速液相色谱-串联三重四级杆质谱测定家蚕血淋巴中阿苯达唑及代谢物的含量的方法，其特征在于，所述步骤(2)和步骤(3)中的分析数据包括阿苯达唑及其代谢物的保留时间、峰面积以及离子碎片质谱检测结果；在所述步骤(2)中，以获得的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标来制作阿苯达唑及其代谢物相应的标准曲线，并得到阿苯达唑及其代谢物相应的回归方程；在所述步骤(4)中，比对供试样品与标准品的保留时间和离子碎片质谱检测结果，对家蚕血淋巴中阿苯达唑及其代谢物进行定性，将阿苯达唑及其代谢物的峰面积数据代入各自相应的回归方程中以计算物质含量，对家蚕血淋巴中阿苯达唑及其代谢物进行定量。