[发明专利]一种用大豆蛋白提取菠萝蛋白酶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用大豆蛋白从菠萝汁提取菠萝蛋白酶的方法。 

背景技术

菠萝蛋白酶(bromelain，EC3.4.22.33)是存在于菠萝植株（包括果、茎、柄和叶片）中的蛋白水解酶，有多个同工酶，其活性中心含有巯基（－SH），所以属巯基蛋白酶。菠萝蛋白酶广泛用于医药、食品、化妆品、纺织、饲料、皮革等行业。它能分解纤维蛋白、血红蛋白等蛋白质，能在副作用较小的情况下使纤维蛋白和血凝块溶解，进而改善体液循环，增加组织通透性，导致炎症、水肿消退；与抗生素、化疗药物合用可促进药物对病灶的渗透和扩散，从而增强疗效。 

蛋白质的提取纯化方法主要有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、单宁(鞣酸)沉淀、离子交换层析、亲和层析、超滤浓缩等方法。菠萝蛋白酶的生产工艺主要有硫酸铵沉淀法、单宁沉淀法、超滤法等，这些方法都有其缺点：硫酸铵沉淀法需要使用大量的硫酸铵，环境污染严重；单宁沉淀法所得的酶制剂难溶于水，酶活力低；超滤法所需设备投资大，菠萝汁超滤浓缩过程中黏度逐渐加大，超滤膜极易堵塞，因此生产周期长，提取收率低。本发明用天然的大豆蛋白来吸附、沉淀菠萝蛋白酶，污染少、收率高，酶的溶解性好、活力高，设备要求低，生产成本低，产品质量好，易于扩大生产规模。 

发明内容

为了解决上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种用大豆蛋白从菠萝汁提取菠萝蛋白酶的方法。 

本发明的目的通过如下技术方案实现： 

一种用大豆蛋白提取菠萝蛋白酶的方法，包括以下步骤： 

(1)去杂质菠萝汁的制备：新鲜菠萝皮或菠萝茎清洗2～5次，洗净附在其表面的泥土等杂质，榨汁，菠萝汁经40～80目滤网过滤，离心分离后， 取上层清液； 

(2)酶的沉淀：在快速搅拌经步骤（1）处理的菠萝汁同时，按1︰10～2︰10（V/V，体积比）加入浓度为0.5～2％（W/V，质量体积比）的大豆蛋白溶液，将pH调至3～5，使菠萝蛋白酶吸附到大豆蛋白上，产生絮状沉淀； 

(3)离心收集酶膏：将经过酶沉淀的菠萝汁离心分离，获得酶膏； 

(4)冷冻干燥：将酶膏冷冻干燥，可得干燥的菠萝蛋白酶成品。 

步骤(1)及步骤(3)中所述的离心是采用高速碟片离心机离心，转速优选为5000～8000转/分钟离心。 

步骤(2)中所述的大豆蛋白为菠萝蛋白酶沉淀剂，从大豆豆饼粉提取，用盐酸或醋酸调整菠萝汁的pH，酶沉淀的最佳温度为4℃。 

步骤(4)中酶膏冷冻干燥预冻温度为-20～-30℃。 

经用上述方法提取出的菠萝蛋白酶具有酶活力高、杂质少的特点，提取工艺简单，生产成本低、回收率高，设备投入少，易于扩大生产规模。 

附图说明

图1为本发明用大豆蛋白提取菠萝蛋白酶的制备工艺流程。 

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。这些实施例仅用于说明本发明，而非用于限制本发明的范围。此外，在阅读本发明的内容后，本领域的技术人员可以对本发明作各种修改，这些等价变化同样落于本发明所附权利要求书所限定的范围。 

实施例1 

将新鲜菠萝皮洗2次，直至洗净附在其表面的泥土等杂质，然后压榨，得到蛋白酶活力约为3000活力单位/毫升的菠萝汁；用40目滤网过滤菠萝汁，去除其中的粗杂质，用高速碟片离心机5000转/分钟将滤液离心后，取上层清液得到杂质少的透明菠萝汁。将菠萝汁的温度控制在4℃，快速搅拌的同时，按1︰10（V/V）将浓度为0.5％（W/V）的大豆蛋白溶液加到菠萝汁中，用盐酸将pH调至3，使菠萝蛋白酶吸附到大豆蛋白上，并产生絮状沉淀；用高速 碟片离心机5000转/分钟离心收集含菠萝蛋白酶的絮状沉淀，得到酶膏；将酶膏预冻至-20℃冷冻干燥，得到干燥的菠萝蛋白酶成品，酶活力达到85万单位/克。 

实施例2