[发明专利]一种石斛的育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物品种培育方法，尤其涉及一种石斛的育种方法。

背景技术

铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo 属兰科多年生附生草本植物，在祖国传统医学中，《本草纲目》称铁皮石斛有“强阴益精厚肠胃，补内绝不足，长肌肉，益智除惊，轻身延年”之功效；作为一种名贵药材，其在《道藏》中被列为中华九大仙草之首。据现代药理学实验证实, 药用石斛的有效成分主要是石斛多糖, 对多种疾病有显著疗效；目前，国内已有数十种以石斛为原料和配伍的中成药产品，如石斛夜光丸、石斛片、金嗓子喉片、脉络宁口服液、脉络宁注射液、养阴口香液、石斛酒（《千金要方》）、石斛散（《圣济总录》）等等，民间还有用石斛治疗疾病的很多偏方。

目前石斛市场需求量很大，野生石斛也因此被大量的采挖，目前已濒临灭绝，为了保护和发展石斛资源，充分发挥石斛巨大的资源优势，推进石斛产业的发展，满足市场对石斛的需求，石斛的种植就显得极其重要。而云南特有的自然资源很适宜石斛生长，在云南种植石斛成本低，品质好，效益高，为此，云南成为了国内药用石斛种植规模和基地数量最多的地方，而在石斛的种植中，存在石斛质量参差不齐，品质得不到保证等问题，因此，选育出品质纯正、适合人工栽培的优良铁皮石斛新品种是势在必行。

由于铁皮石斛种子极小，无胚乳，自然繁殖率极低，加上人为过度采集和自然环境破坏，目前我国野生铁皮石斛资源濒临灭绝，已被列为国家二级保护植物。

为了满足铁皮石斛人工种植对优良种苗的需要，一些石斛品种被人工选育，通过有性繁殖和无性繁殖的方式对铁皮石斛进行人工种植，如浙江省选育出铁皮石斛新品种仙斛1号、仙斛2号，广东省选育出中科1号、中科从都铁皮石斛，云南省红河选育出红鑫1号，普洱民族药物研究所选育出普洱一号、二号等，但这些品种都是一些全同胞或半同胞家系，即对特定亲本进行自交或杂交后，再用其蒴果（内含种子）繁殖形成下一代种苗群体，如仙斛一号，选育单位筛选出表现较优的Sxg-2，表现出了明显的生长优势，用其人工授粉的种子(蒴果)进行了组培快繁，获得了大量的实生苗。这种有性繁殖的方法因铁皮石斛在自然条件下是昆虫传粉，亲本基因杂合，自交或杂交得到的后代之间基因型是异质，这样就导致了同一品种的世代内一致性和世代间稳定性较差。对于无性繁殖，由同一植株的营养器官用扦插、压条或组织培养法繁殖，不发生由于两性细胞结合而导致的基因重组所造成的性状分离，个体间性状相对一致，世代间稳定性较高。

一些石斛品种被人工选育，也通过杂交方式用于石斛种子创新，如在铁皮石斛开花时进行人工授粉，再选择多个亲本配制杂交组合，再用杂交果实作为外植体扩繁得到种苗；尽管利用茎尖、茎段等器官无性繁殖产生丛生芽获得再生植株的研究已有报道，如国内在铁皮、金钗等多种石斛已有成功的报道，国外Arditti 等和 Mosich 等利用石斛茎节段作为外植体，进行石斛无性繁殖成功，但将此二者结合起来培育石斛无性系品种目前尚未见公开报道。

发明内容

本发明的目的在于提供采用有性繁殖方式和无性繁殖方式相结合的培育石斛无性系品种的一种石斛的育种方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种石斛的育种方法，根据步骤完成：

步骤一，收集铁皮石斛种；

步骤二，在所收集铁皮石斛种中选出整体表现较好的作为亲本进行自交，得到蒴果；

步骤三，将得到的蒴果播种在培养基上；

步骤四，对培养基上所生出的后代实生苗种苗，根据株高、茎粗等外观指标筛选出表现较好的单株，对筛选的单株进行无性扩繁；

步骤五，对步骤四得到各无性株系，进行炼苗、移栽, 得到无性系石斛。

上述技术方案中， 步骤三的培养基为：在1/3MS培养基的基础上加入浓度为0.1mg/L的激动素KT、浓度为0.1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和体积分数为5%的土豆汁，其中土豆汁采用现在公知方法制取即可。

上述技术方案中，步骤三中蒴果在培养基上的培养过程为：在温度23~28℃，光照强度为800~1200lux，光照时间为（8h~10h）/24h，培养90天，其间每30天换一次培养基。其中，光照时间为（8h~10h）/24h是指：每24h中光照8h~10h。

优选地是，步骤三中蒴果在培养基上的培养过程为：在温度25℃，光照强度为1000lux，光照时间为8h/24h，培养90天，其间每30天换一次培养基。