[发明专利]一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡及其检测方法

说明书

技术领域

本发明专利是涉及医学临床诊断技术领域，特别是涉及一种以免疫胶体金快速检测方法制备的一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡及其检测方法。

背景技术

结核病是由结核杆菌(tubercle bacillus)感染引起的慢性传染病。结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病(pulmonary tuberculosis)。

全球现有6亿人，感染有结核杆菌。大多数的受感染者没有病症，称为潜伏结核感染，但其中约5-10％的潜伏感染者会发展至活动性结核；若无适当治疗，一个活动病例平均每年可使10～15人新受感染，病例本人的死亡率则超过50％。

结核病目前的主要的检测或诊断方法有：

1、痰结核菌检查：痰涂片检查或痰结核菌培养。是结核病诊断的确诊方法之一，检查简便易行，准确性较高，但这种方法诊断的阳性率很低，灵敏度在40％以下，若培养则需6-8周时间，诊断时间过长。

2、结核病的影像学诊断：如胸部X射线和CT等。X射线可以早期发现结核病，确定病灶的部位、性质、范围，了解发病情况及用于治疗效果的判断，胸部CT可以发现较小的或隐蔽部位的病变，可以弥补一般X线检查的不足。X线检查对肺结核病的初筛、诊断等起重要辅助作用，但存在需要大型设备，费用较高，胸片存在20％左右的低读率和读过率。

3、分子生物学技术诊断：主要指结核杆菌聚合酶链反应(PCR)方法，该方法的灵敏度很高，但存在较高的假阳性，特异性差，并且诊断费用较高。

4、免疫学诊断：免疫学诊断有结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验和抗体诊断等方法。PPD试验较为传统的诊断方法之一，在临床上经常使用。该试验阳性是感染过结核菌的证据之一，不能很好的区分现症感染和既往感染。抗体诊断方法：检测血清中抗TB免疫球蛋白(IgG)抗体，该方法的灵敏度为60％-80％，特异性为90％。是结核临床诊断上常用的方法之一，抗体诊断试剂主要为ELISA试剂和免疫层析胶体金快速诊断试剂。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试剂的NC膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测T线，从而实现检测。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

目前利用胶体金技术检测结核抗体的试剂已有部分报道。但本专利拟公开检测卡试剂在设计和检测方法上均和目前报道的不同。主要体现在4个方面：1)检测卡的加样孔设置在检测卡的中上部；2)采用了TB16，TB38和Lam三种抗原混合包被检测线，使得产品的性能提高。3)加样孔设置在检测卡的中上部，利用NC膜分离血清，可以直接检测全血样本，无需作任何前处理。4)加样孔设置在检测卡的中上部，实现了不同的反应原理，样本将先和抗T线上的抗原反应，样本中无关的IgG绝大部分会被稀释液洗涤，不和胶体金标记的抗体反应，消除倒沟效应，这和所有从下部加样的试剂反应原理不同。

发明内容

本发明目的是提供一种新型一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡及其检测方法，用来检测血清、血浆和全血样本中的TB抗体。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。发明内容如下：

一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡，其特征在于检测卡由内部的结核分枝杆菌(TB)抗体检测试纸和外部的配套专用卡壳组成。

所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于试纸由含有胶体金标记的抗人IgG抗体或SPA的胶体金垫、包被有TB38、TB16、Lam三种结核特异性混合抗原(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。试纸的宽度为3-5mm，总长度为7-9cm。稀释液垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端。稀释液垫长度2-2.5cm；胶体金垫长度为0.6-1cm；NC膜长度2-3cm，吸样垫长度为1.5-2.5cm。

所述的快速检测卡，其特征在于配套专用卡壳包含上盖和下盖两个部分，卡壳内部用来放置TB抗体检测试纸。卡壳上盖的下部对应稀释液垫部分设置了稀释液孔，用于滴加样本稀释液，卡壳上盖的中间部分应对试纸NC膜中下部分设置了视窗口，用于观察NC膜上的C、T线，判定结果。卡壳上盖的中上部分应对试纸NC膜上部设置了样品孔，用于加入检测样本。