[发明专利]一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡及其检测方法

权利要求书

1.一种结核分枝杆菌抗体快速检测卡，其特征在于检测卡由内部的结核分枝杆菌(TB)抗体检测试纸和外部的配套专用卡壳组成。

2.根据权利要求1所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于试纸由含有胶体金标记的抗人IgG抗体或SPA的胶体金垫、包被有TB38、TB16、Lam三种结核特异性混合抗原(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。试纸的宽度为3-5mm，总长度为7-9cm。稀释液垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端。稀释液垫长度2-2.5cm；胶体金垫长度为0.6-1cm；NC膜长度2-3cm，吸样垫长度为1.5-2.5cm。

3.根据权利要求1所述的快速检测卡，其特征在于配套专用卡壳包含上盖和下盖两个部分，卡壳内部用来放置TB抗体检测试纸。卡壳上盖的下部对应稀释液垫部分设置了稀释液孔，用于滴加样本稀释液，卡壳上盖的中间部分应对试纸NC膜中下部分设置了视窗口，用于观察NC膜上的C、T线，判定结果。卡壳上盖的中上部分应对试纸NC膜上部设置了样品孔，用于加入检测样本。

4.根据权利要求1和2所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于所述NC膜是一种由硝酸纤维素构成的多孔结构的膜，孔径为6-12um。稀释液垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫为吸水滤纸。

5.根据权利要求1所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于抗原的包被方法为：以0.01MpH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)将TB38、TB16和Lam混合抗原配制成合适的浓度，优选混合抗原浓度为TB38、TB16和Lam为0.5、0.3和0.1mg/ml，在喷膜仪在NC膜上以1.2-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被1-2mg/ml的抗鼠IgG作为C线。干燥，备用。

6.根据权利要求1和2所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于标记胶体金颗粒的方法为：取100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M K2CO3调至pH7.0-8.0，按100ml胶体金液加入1mg抗人IgG或SPA，室温搅拌1小时，封闭，12000rpm离心30分钟，弃上清，用工作液复溶至60ml，按每毫升溶液铺20cm2的比例分别均匀地铺在胶体金垫上，干燥备用。

7.根据权利要求1所述的TB抗体快速检测卡，其特征在检测卡装配方法为：在相对湿度小于30％的条件下，取塑料底板，将已包被的NC膜粘贴在底板的中部，在NC膜T线一侧粘贴胶体金垫，在胶体金垫另一侧粘贴稀释液垫；在NC膜C线一侧粘贴吸样垫；各粘贴组分接口相互叠压1-2mm，粘贴好的大板切成3-5mm宽的试纸条。放置于卡壳下盖的槽中，然后盖上上盖，压紧，完成装配。

8.根据权利要求1所述的TB抗体快速检测卡，其特征在于检测方法为：检测时将少量(3-10ul)被检样本如血清、血浆、全血、胸水、腹水或脑脊液等加入到对应NC膜加样孔中，样本将在NC膜上由上至下层析，经过NC膜的C、T线，然后在稀释液孔加入样品稀释液，稀释液将溶解胶体金，在NC膜上由下至上层析，推动样本回流，并在NC膜上形成免疫反应。在15分钟内根据C、T线的出现情况判定检测结果，实现对TB抗体的快速检测。