[发明专利]一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明属于中药分析技术领域。具体涉及一种化橘红有效部位及其制剂有效成分的质量控制方法。 

背景技术

化橘红是岭南特色中药，收载于2010年版《中华人民共和国药典》(一部)。化橘红为芸香科植物柚 Citrus grandis (L.) Osbeck及其栽培变种化州柚Citrus grandis ‘Tomentosa’的干燥幼果或干燥外层果皮。具有理气宽中、燥湿化痰的功效，用于治疗咳嗽痰多，食积伤酒，呕恶痞闷等症。

中国植物志记载，化州柚为柚的栽培变种。现今市场上的化橘红药材多以柚来源为主。据文献报道，化橘红活性成分分为两大类：以柚皮苷为代表的黄酮类物质及香豆素类物质。但已有研究表明，化州柚含的药用成分比柚高，药用效果更佳。目前化橘红有效部位及其制剂的质量标准缺乏全面的质量控制方法，容易被仿制或掺伪。化橘红药材原质量标准收载于2010年版《中华人民共和国药典》(一部)，【鉴别】项分别以柚皮苷对照品为对照，进行薄层鉴别；【含量测定】项采用高效液相色谱法测定化橘红中柚皮苷的含量。因此为提高临床疗效，对化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法研究具有实用价值和重大意义。

发明内容

中药强调从整体上发挥作用，多半不是针对某个靶点，也不是若干成分的简单加合，仅靠单一成分的检测降低了鉴别的准确和专属性，不能代表中药制剂的整体功效，不能反映其内在质量，也不能解决伪品掺杂等问题。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的化学鉴定手段，可以鉴别真伪，评价原料药材、半成品和成品质量的均一性和稳定性，体现了中药作用的整体性和模糊性。色谱指纹图谱通过图谱主要特征峰的峰位，面积或比例，反映出化学成分的种类及数量的特征性，有效地判别真伪，评价优劣。在构建的指纹图谱基础上，发明人试图通过一测多评法对有效成分进行含量测定，从量上阐明有效成分间的相互比例关系，对指纹图谱数据进一步地定量分析，为中药多指标质量评价提供了新的研究思路。色谱指纹图谱结合一测多评法定量分析成为鉴别中药真实性及全面评价质量一致性和产品稳定性的可行的模式。

据此，本发明的目的在于提供一种可同时定性定量测定化橘红有效部位及其制剂中多种有效成分含量，并构建全面评价及监控其质量的方法。

技术方案具体为：

一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法，包括以下步骤：

一、建立对照品的高效液相色谱及供试品的高效液相色谱指纹图谱。

制备含待测组分新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、melitidin和柚皮素的混合对照品溶液，各组分的浓度优选为10~500μg。

制备化橘红有效部位或其制剂的甲醇溶液作为供试品溶液。

采用高效液相色谱法分析上述对照品溶液和供试品溶液，色谱条件为：进样量5~20μl；色谱柱为ODS C₁₈， 250mm×4.6mm，5μm；流动相为用甲醇－甲酸或乙酸或磷酸或三氟乙酸调至pH为3.0的水溶液，梯度洗脱；检测波长：320nm；理论塔板数按柚皮苷计算建议不低于5000。所述梯度洗脱步骤优选为：0~50分钟，流动相甲醇：水由30:70渐变为60:40。

分别得到对照品的高效液相色谱图及供试品的高效液相色谱指纹图谱。

二、鉴定步骤，将上述两图谱进行比较，供试品的图谱包含与对照品图谱相同的色谱峰；供试品图谱与已建立的对照指纹图谱比较，相似度大于0.90，可判断供试品为合格产品。

所述供试品的高效液相色谱指纹图谱与已建立的对照指纹图谱比较共有17个共有特征峰，各特征峰的保留时间分别为3min、5min、9min、13min、15min、19min、20min、23min、24min、25min、28min、30min、31min、33min、35min、39min、40min，其中保留时间为15min、19min、20min、25min、30min、31min、35min的7个特征峰依次与对照品色谱图中新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素相同。

本发明中对照指纹图谱是指经证实符合质量要求的化橘红有效部位或其制剂10批次以上的供试品的甲醇提取液在上述色谱条件下经高效液相色谱分析法，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》建立的指纹图谱共有模式图谱。

三、多种有效成分含量的同步测定。