[发明专利]一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)将绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)接种到经过高温灭菌的液体培养基中并置于全自动控温摇床上，控制转速为180-240rpm，在25-30℃下培养1-3天得到含有绿针假单胞菌的液体种子；

(2)将液体种子液移入到经过高温灭菌的装在发酵罐中的培养基中，控制发酵罐转速为180-240rpm，在25-30℃下培养2-5天，即得到含有吩嗪-1-甲酰肼的发酵液；

(3)将含有吩嗪-1-甲酰肼的发酵液在搅拌下用酸调节pH至2-4，然后进行过滤，得到的滤液用溶剂进行萃取、分离、浓缩、结晶及干燥，即制备得到吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂。

2.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，所述的绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)，其微生物保藏登记号为：CGMCC NO.6773。

3.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的液体培养基的配方采用以下组分及重量百分比含量：玉米粉1-5％、豆饼粉2-8％、蛋白胨1-3％、K₂HPO₄0.01-0.03％、KH₂PO₄0.01-0.03％、无水硫酸镁0.03-0.08％、甘油0.1-0.3％，余量为水，液体培养基的pH为6.5-7.5。

4.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的培养基的配方采用以下组分及重量百分比含量：玉米粉1-5％、豆饼粉2-8％、蛋白胨1-3％、K₂HPO₄0.01-0.03％、KH₂PO₄0.01-0.03％、无水硫酸镁0.03-0.08％、甘油0.1-0.3％，余量为水，培养基的pH为6.5-7.5。

5.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的酸选用盐酸、硫酸或草酸。

6.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)采用膜过滤、板框过滤或离心机过滤处理含有吩嗪-1-甲酰肼的发酵液。

7.根据权利要求1所述的一种吩嗪-1-甲酰肼生物杀菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的溶剂为乙酸乙酯、氯仿或乙酸丁酯。