[发明专利]密码子优化的Cry1Ca#基因与重组载体以及改变作物抗性的方法有效
申请号: | 201310305677.1 | 申请日: | 2013-07-19 |
公开(公告)号: | CN104292314B | 公开(公告)日: | 2017-11-17 |
发明(设计)人: | 肖国樱;邓力华;邓晓湘;魏岁军 | 申请(专利权)人: | 中国科学院亚热带农业生态研究所 |
主分类号: | C07K14/325 | 分类号: | C07K14/325;C12N15/63;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司11283 | 代理人: | 王崇,刘国平 |
地址: | 410125*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 密码子 优化 cry1ca sup 基因 重组 载体 以及 改变 作物 抗性 方法 | ||
1.一种人工优化设计的Cry1Ca#基因,其特征在于,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,且该Cry1Ca#基因能够编码对鳞翅目昆虫具有致死活性的多肽。
2.一种人工优化设计的Cry1Ca#基因,其特征在于,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列为如下的核苷酸序列:在SEQ ID No.1的5’端连接有信号肽序列,3’端连接有亚细胞器定位信号序列。
3.根据权利要求2所述的Cry1Ca#基因,其中,所述信号肽序列为如SEQ ID No.3所示的PR1a信号肽序列,所述亚细胞器定位信号序列为如SEQ ID No.4所示的内质网滞留信号KDEL序列。
4.根据权利要求3所述的Cry1Ca#基因,其中,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;且该Cry1Ca#基因能够编码N端具有PR1a信号肽、C端具有内质网滞留信号的对鳞翅目昆虫具有致死活性的多肽,所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示。
5.一种人工优化设计的Cry1Ca#基因,其特征在于,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列为如下的核苷酸序列:在权利要求1-4中任意一项所述的Cry1Ca#基因的5’端连接有限制性内切酶识别序列和Kozak序列,且该Cry1Ca#基因的3’端连接有限制性内切酶识别序列。
6.根据权利要求5所述的Cry1Ca#基因,其中,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
7.一种人工优化设计的Cry1Ca#基因,其特征在于,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列为如下的核苷酸序列:在权利要求1-6中任意一项所述的Cry1Ca#基因的5’端连接有启动子序列和增强子序列、3’端连接有转录终止子序列。
8.根据权利要求7所述的Cry1Ca#基因,其中,所述启动子序列的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示,且能够启动Cry1Ca#基因的转录;所述增强子序列的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示,且能够增强Cry1Ca#基因的转录;所述转录终止子序列的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示并能够终止Cry1Ca#基因的转录。
9.根据权利要求8所述的Cry1Ca#基因,其中,该Cry1Ca#基因的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示。
10.一种重组载体,其特征在于,该重组载体插入有权利要求1-9中任意一项所述的Cry1Ca#基因,该重组载体能够使所插入的Cry1Ca#基因得到表达。
11.根据权利要求10所述的重组载体,其中,该载体插入有SEQ ID No.7所示的序列。
12.根据权利要求10或11所述的重组载体,其中,该重组载体还插入有Bar基因,并且能够使Bar基因得到表达;所述Bar基因的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示,且所述Bar基因能够编码具有抗草铵膦活性的多肽。
13.根据权利要求10或11所述的重组载体,其中,该重组载体还插入有Bar基因,并且能够使Bar基因得到表达;所述Bar基因的核苷酸序列为如下的核苷酸序列:在SEQ ID No.12的5’端连接有启动子序列,3’端连接有终止子序列;所述启动子序列的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示,且能够启动Bar基因的转录;所述终止子序列的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示,且能够终止Bar基因的转录。
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