[发明专利]一种检测食品中马肉成分的方法

说明书

本发明涉及一种检测食品中马肉成分的方法。本发明提供了用于检测食品中马肉成分的6对不同目的片段的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1、NO.2、NO.3、NO.4、NO.5、NO.6、NO.7、NO.8、NO.9、NO.10、NO.11、NO.12所示。本发明还提供了含有上述引物组的试剂盒。本发明的试剂盒可以快速、准确检测肉制品中是否掺杂马肉，其中对于检测深加工肉制品效果尤为明显。本发明还可为食品检验人员在对比检测其他肉源时提供灵活多变的目的片段，进而提高检测效率，另外本发明提供的引物也可作为实时荧光定量PCR的引物，对食品中掺杂的马肉成分进行定量，更好的应用于食品检测领域。

技术领域

本发明属于食品检测领域和分子生物学技术领域，具体来说，涉及一种利用PCR技术检测食品中马肉成分的方法。

背景技术

2013年1月中旬英国和爱尔兰发现部分超市出售的牛肉汉堡中掺杂了马肉和其他肉类，其中在被检测的27种汉堡中，有10种含有马肉。此后，“挂牛头卖马肉”的事件持续扩大，多个欧洲国家卷入丑闻中，消费者对食品工业的信任遭受了严重的打击，欧盟也为此对成员国的加工牛肉展开“DNA检测”以消除“马肉风波”忧虑，恢复消费者信心。

在我国，近年来食品安全问题群众反映强烈、社会关注度高。一些食品生产商为一己私利，投机取巧、以次充好、偷工减料，在损害消费者利益的同时，严重危害人们的生命健康。此外，我国还没有健全统一的熟肉制品快速检测标准。通常对于生肉制品我们可以通过味道、色泽、肌肉纹理等进行检测，但对于经过加工的熟肉制品我们很难用这种传统的理化方法进行检测。

PCR技术(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)作为一种快速而又灵敏度高、特异性强的分子生物学检测手段，已广泛应用于诸多检测领域。同时由于线粒体DNA为核外遗传物质，种内高度保守，同时与核DNA相比，具有分子结构简单、母性遗传方式遗传、进化速度快等特点，大量存在于组织细胞中，具有抗腐蚀性，使用少量样品即可进行PCR反应。本发明利用PCR技术，扩增马的线粒体DNA(mtDNA)达到检测目的。检测手段不仅简便易行，而且时间周期短、效率高、适用于食品快速检测领域。

发明内容

本发明目的在于，提供一组优选后的检测食品中马肉成分的PCR引物对。

本发明的第二个目的是提供一种含有上述引物组，用于检测食品中马肉成分的试剂盒。

本发明的第三个目的是为食品检验人员对比检测其他肉源提供灵活多变的选择，进而提高检测效率，更好的应用于食品检测领域。

本发明的第四个目的是为进行实时荧光定量PCR，检测食品中掺杂马肉成分的含量提供引物对。

本发明的技术方案概述如下：

一种检测食品中马肉成分的PCR引物组，由1号引物对、2号引物对、3号引物对、4号引物对、5号引物对、6号引物对组成，所述1号引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和2所示，所述2号引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和4所示，所述3号引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5和6所示，所述4号引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.7和8所示，所述5号引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9和10所示，所述6号引物对的核苷酸序列分另如SEQ ID NO.11和12所示。