[发明专利]一种纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法无效

专利信息
申请号: 201310302179.1 申请日: 2013-07-15
公开(公告)号: CN103468652A 公开(公告)日: 2013-12-25
发明(设计)人: 相建海;谢世筠;李富花 申请(专利权)人: 中国科学院海洋研究所
主分类号: C12N7/02 分类号: C12N7/02
代理公司: 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 代理人: 周秀梅;李颖
地址: 266071*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 纯化 fitc 标记 白斑 综合症 病毒 wssv 方法
【权利要求书】:

1.一种纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:将经FITC标记的虾白斑综合症病毒混合液利用分子筛柱进行纯化;收集含有FITC标记的WSSV的洗脱液,即得到纯化的可视化WSSV;其中,分子筛柱填料为G-25M,洗脱液为PBS缓冲液。

2.按权利要求1所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:将经FITC标记的虾白斑综合症病毒混合液转移至装填有G-25M分子筛填料的分子筛柱,整个过程用PBS作为洗脱液,并依靠重力进行洗脱;收集含有FITC标记的WSSV的洗脱液,即得到纯化的可视化WSSV;其中,装填有G-25M分子筛填料的分子筛柱先经2倍柱体积的PBS清洗。

3.按权利要求1或2所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:所述FITC标记的WSSV混合液为将保存于PBS溶液中浓度为3.0×106Copy/μl的虾白斑综合症病毒与FITC溶液按照体积比5-10:1混合,室温下孵育0.5-2h。

4.按权利要求3所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:所述FITC溶液浓度为1μg/μl。

5.按权利要求3所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:所述孵育在水平摇床或杂交炉中进行。

6.按权利要求5所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:所述水平摇床转速为30-100rpm。

7.按权利要求1或2所述的纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法,其特征在于:所述收集的洗脱液经考马斯亮蓝法检测蛋白含量,将病毒含量最高(即蓝色最深)洗脱液混合,即得到含有FITC标记的WSSV的溶液,置于4℃避光保存。

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