[发明专利]一种蜡状芽孢杆菌及其益生菌粉及该菌粉的制备和用途

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体的说是一种蜡状芽孢杆菌BC158及其益生菌粉及该菌粉的制备和用途。 

背景技术  

从养殖场到餐桌的食品安全工程是一项非常复杂的工程，饲料安全作为食物链中的一个部分，无疑也是重要的一环，因此对于加强安全饲料添加剂的研发与应用具有广阔的前景，大有可为。现代集约化畜牧生产限制了动物接触土壤以及其周围的自然环境，这种饲养条件下不利于动物建立胃肠道的正常菌群。当外界环境条件发生变化时，容易导致动物胃肠道微生态菌群失调从而降低对病原菌的抵抗力。目前主要是通过改善饲养管理和在日粮中添加抗生素的方法来降低这种损失，但随着抗生素在饲料添加剂中的广泛使用，它的弊端正日益凸现，如导致动物胃肠道菌群失调，因为长期以来抗生素一直是预防和治疗仔猪黄白痢最主要的途径，虽然在一定程度上抑制了病原菌的生长，但同时也抑制了肠道内正常菌群发挥作用，长期的使用容易引起消化道疾病；而且耐药菌株不断增加，抗生素在畜禽体内的残留也严重威胁到人类的健康。鉴于此，反对在饲料中添加抗生素的呼声越来越高。瑞典政府于1986年就开始在动物饲料中禁用抗生素类生长促进剂，1995丹麦、德国和芬兰等国也相继规定禁止在动物饲料中使用艾维菌素、泰乐菌素、螺旋霉素等抗生素，到2006年欧盟已全面禁止食品动物使用抗生素促生长饲料添加剂，其他发达国家，如美国、日本、韩国等也相继实施了禁令。大部分抗生素在我国动物生产中也逐步被限制用于饲料。

但同时，欧盟科学程序委员会1997年提出了由于抗生素的禁用而出现的抗病力受阻问题。丹麦2001年发表了自1997年抗生素禁用后的5年时间内食源性动物、食物和人类中抗菌药物使用量、抗病力受阻问题的年度监测报告。报告指出，饲料中抗生素的使用量减少，使猪抗病力下降，禁用抗生素后用于控制动物亚临床疾病的成本显著提高，尤其是动物处于管理水平一般或比较差的农场问题更为突出。 

Jongbloed（1998）指出，抗生素促生长剂导致荷兰饲料利用率下降3%-8%。有研究也证实，禁用抗生素后，尽管生长猪、育肥猪应激减少，但仔猪的生产性能下降。Hedegaard (2001)指出，饲料中不用抗生素促生长剂后丹麦用于治疗断奶仔猪疾病的抗生素用量增加。丹麦全国生猪生产委员会曾收集了62家丹麦育肥猪生产企业猪群停用抗生素后的生产情况，结果发现，11%群体持续出现生产性能显著下降等一系列问题，26%的猪群出现了暂时性日增重下降，只有63%的猪群未因停用而导致日增重下降或下痢增加的现象。自1995-2000年期间，从使用抗生素到减少使用量，再到禁用抗生素，断奶保育猪日增重下降、腹泻率增加、慢性病感染率增加、营养需求增加但饲料效益下降。 

在这种情况下，寻求一种无毒、无残留、应用效果好的饲料添加剂显得尤为必要，抗生素替代物的研究开发引起各国的重视。微生态制剂是抗生素的替代物之一，其中芽孢杆菌由于能形成休眠芽孢，具有耐高温、耐酸等特性，具有更广阔的应用前景。CN102517238A曾经报道了一种产酸蜡状芽孢杆菌及菌剂制备方法，但对于饲用益生芽孢杆菌而言，同时兼具多种高水解酶活性，且具有良好安全性和高粘附能力的菌株目前还未见报道。CN102093974A曾经报道过一株蜡状芽孢杆菌及其多阶段发酵方法，但该方法采用精细原料作为发酵培养基必将导致发酵成本的增加，而且控制过程比较复杂，缺乏发酵液结束后菌体回收工艺环节使得菌体的保藏、运输及使用受到很大限制，因此该工艺也较难在饲用益生菌工业化生产过程中推广和应用。 

发明内容

本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种蜡状芽孢杆菌BC158、蜡状芽孢杆菌益菌粉及其制备方法和用途；蜡状芽孢杆菌益菌粉的制备方法简单，成本低廉，所制备出的蜡状芽孢杆菌益生菌粉，蜡状芽孢杆菌的活菌含量为3×10⁹-5×10¹⁰CFU/g，可应用于动物养殖的饲料添加剂。 

一种蜡状芽孢杆菌益生菌粉，其具体制备步骤为： 

步骤一、斜面固体培养：将蜡状芽孢杆菌(Bacillus.cereus) BC158接种在固体斜面培养基上，37℃培养24h，得到斜面固体培养的菌种，备用；

所述的固体斜面培养基的组成成分为：按质量百分比，固体斜面培养基中含有牛肉膏0.3%-0.4%，蛋白胨1%-1.2%，氯化钠0.5%，琼脂粉1.5%-2%，余量为水；