[发明专利]一种禽流感疫苗组合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的禽流感疫苗组合物包括脂质体、免疫量的M2和/或3M2e蛋白；所述M2蛋白的序列为SEQ ID NO.2，所述3M2e蛋白的序列为SEQ ID NO.4。

2.根据权利要求1所述的禽流感疫苗，其特征在于，所述的脂质体膜材包括磷脂、固醇类；优选地，所述脂质体的膜材包括卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂、磷脂酰乙醇胺、胆固醇、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰、牛胆酸钠、蛋磷脂酰胆碱、磷脂酰丝胺酸、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、鞘髓磷脂、二鲸蜡磷酸酯、二肉豆蔻卵磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、硬质酰胺、二氧乙烯十六烷基醚、四氧乙烯十二烷基醚中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的脂质体是中性脂质体、负电性脂质体或正电性脂质体；优选地，所述的脂质体为正电性脂质体。

4.根据权利要求1所述的禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的脂质体将M2和/或3M2e包裹于脂质体内或镶嵌于脂质体膜中或由于电荷作用而吸附于膜上。

5.根据权利要求1所述的禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的脂质体为小单室、大单室和多室脂质体共存的脂质体。

6.根据权利要求1所述的禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的流感疫苗单位剂量中含流感病毒M2和/或3M2e蛋白组分的含量为40-500μg，优选为50-100μg。

7.根据权利要求1所述的禽流感疫苗组合物，其特征在于，所述的禽流感疫苗组合物进一步包括免疫调节组分，所述免疫调节组分优选维生素E。

8.一种制备权利要求1所述的禽流感疫苗组合物的方法，所述制备方法包括：

（1）将M2、3M2e蛋白分别用含稳定剂的缓冲液制备成禽流感抗原原液；

（2）将脂质体原料溶于有机溶剂中，将所述脂质体溶液于旋转蒸发仪中真空旋转蒸发，成膜；在膜材中加入所述缓冲液，并加入几粒小玻璃珠，旋转蒸发，待薄膜从瓶壁上完全脱落后，静置得空脂质体；

（3）将所述禽流感抗原原液加入制得的空脂质体中，用高压匀浆机高压均质循环脂质体颗粒，除菌过滤，即成所述禽流感疫苗组合物。

9.根据权利要求8的制备方法，其中，所述步骤（1）中的所述稳定剂为氨基酸、单糖、二糖、多元醇中的一种或几种；所述步骤（2）中的所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙醚、丙酮溶液中的一种或几种；所述步骤（2）中所述膜材的终浓度为1%-5%（W/W），优选为2%（W/W）；所述步骤（2）中所述旋转蒸发温度为30-65℃,所述高压压力为15-30Kpa；所述步骤（1）、（2）中的所述缓冲液为pH值为5.4-7.8范围内的磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、碳酸钠缓冲液、生理盐水中的一种或几种。

10.根据权利要求1-7任一项所述的禽流感疫苗在制备预防和/或治疗不同亚型禽流感的药物中的应用。