[发明专利]一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法。

背景技术

鞣花酸(Ellagic acid，C₁₄H₆O₈)和没食子酸(Gallic acid，C₇H₁₆O₅)是存在于各种软果、坚果组织中的天然多酚组分。

鞣花酸具有抗氧化功能、抗癌、抗突变性能、对人体免疫缺陷病毒的抑制作用等多种生物活性功能。鞣花酸还具有降压、镇静作用，鞣花酸还是一种有效的凝血剂，对多种细菌、病毒都有很好地抑制作用，能保护创面免受细菌的侵入，防止感染，抑制溃疡。目前，美国等发达国家中，鞣花酸是畅销的双向基因修饰的抗癌保健品，国际市场产品价位很高。

没食子酸具有SOD活性、可阻碍酪氨酸活性、透明质酸酶活性，具有抗衰老、防治色斑褐斑、黑色素生成、抗过敏等功能，没食子酸还具有防止色素褪色作用、消臭作用、抗菌作用，可用于美白保湿效果的化妆品，抗炎症抗应变、减肥保健等生理功能的保健食品。

香菇作为食药用真菌，已被人类广泛利用，香菇具有较高的营养价值和药用价值，含有多种生物活性成分，具有预防和治疗多种疾病功能。

目前制备鞣花酸和没食子酸的方法主要有溶剂提取法、化学合成法、酶法。溶剂提取法利用溶剂直接从含有鞣花酸和没食子酸的植物中提取，但得率较低；化学合成法主要利用酸水解法，存在设备腐蚀、环境污染重、脱色用炭多、生产成本高等问题；酶法制备所需酶制剂价格高，要求酶促转化条件严格，不易控制。本方法利用生物发酵制备鞣花酸和没食子酸后，发酵废料可再利用，用于鸡腿菇栽培、家畜家禽饲料、花卉蔬菜栽培基质、生产活性炭和灭菌燃料，既节约能源，又节省生产投资，同时也解决了废料造成的环境污染问题。

发明内容

本发明是为了要解决现有制备鞣花酸和没食子酸的方法的环境污染、腐蚀设备、成本高、得率低的问题，提供了一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法。

本发明一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，是通过以下步骤进行的：

一、固体发酵：a、将香菇菌种接种在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，培养7～10天后，取4～6片的长有香菇气生菌丝直径为2.5cm～3.0cm的培养基圆片；其中培养基圆片中香菇气生菌丝高度为1.0～2.0mm；

b、按质量份数称取1份石膏，0.2份硫酸镁，0.3份磷酸二氢钾，1份过磷酸钙，1份鱼蛋白水解液、0.002份三十烷醇和96～97份水，然后混合得到溶液A；按质量份数称取56.5～66.5份锯木屑、10～20份蓝莓果渣和20份麦麸，然后进行混合，得到固体B；

c、将固体B与溶液A按质量比为1：（1.2～1.8）的比例混匀，调节pH为5.5～6.0，121℃灭菌1h，冷却至25℃，得到固态发酵培养基；然后将步骤a得到的培养基圆片长有香菇气生菌丝体一侧在无菌条件下置于固态发酵培养基表面，在28℃、相对湿度为70%～75%的条件下培养20～25天，得到含有鞣花酸和没食子酸的培养产物；

二、鞣花酸和没食子酸的提取制备

将含有鞣花酸和没食子酸的培养产物与质量浓度为95%乙醇按质量体积比为1g：2mL比例加入质量浓度为95%乙醇进行提取，然后在转速为70rpm的条件下搅拌5min，再180W超声处理30min，然后在真空度为0.06MPa的条件下真空抽滤，得到提取液，再将提取液在3000rpm、25℃的条件下离心15min，取上清液；然后在0.08MPa、60～70℃的条件下减压浓缩至上清液总体积的30～40%，得到浓缩液，再真空冷冻干燥，得到鞣花酸和没食子酸，即完成香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸。

本发明以香菇为发酵菌种，以蓝莓果渣为发酵底物，进行固态发酵。香菇在固态发酵过程中可以合成和分泌出大量的纤维素酶、漆酶和酪氨酸酶等酚氧化酶，催化底物代谢，降解生成鞣花酸和没食子酸。鞣花酸和没食子酸产量提高350%以上。采用本发明的方法制备鞣花酸和没食子酸，具有反应温和，无设备腐蚀，产品安全，产品产量质量稳定，产品可控性强，尤其是发酵废料可综合再利用等优势，适用于功能食品、化妆品、及其它健康相关产品。

附图说明

图1为试验1～试验3中鞣花酸和没，食子酸产量的曲线；其中a为试验1中鞣花酸和没食子酸产量的曲线，b为试验2中鞣花酸和没食子酸产量的曲线，c为试验3中鞣花酸和没食子酸产量的曲线。