[发明专利]一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法

权利要求书

1.一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法是通过以下步骤进行的：

一、固体发酵：a、将香菇菌种接种在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，培养7～10天后，取4～6片的长有香菇气生菌丝直径为2.5cm～3.0cm的培养基圆片；其中培养基圆片中香菇气生菌丝高度为1.0～2.0mm；

b、按质量份数称取1份石膏，0.2份硫酸镁，0.3份磷酸二氢钾，1份过磷酸钙，1份鱼蛋白水解液、0.002份三十烷醇和96～97份水，然后混合得到溶液A；按质量份数称取56.5～66.5份锯木屑、10～20份蓝莓果渣和20份麦麸，然后进行混合，得到固体B；

c、将固体B与溶液A按质量比为1：（1.2～1.8）的比例混匀，调节pH为5.5～6.0，121℃灭菌1h，冷却至25℃，得到固态发酵培养基；然后将步骤a得到的培养基圆片长有香菇气生菌丝体一侧在无菌条件下置于固态发酵培养基表面，在28℃、相对湿度为70%～75%的条件下培养20～25天，得到含有鞣花酸和没食子酸的培养产物；

二、鞣花酸和没食子酸的提取制备

将含有鞣花酸和没食子酸的培养产物与质量浓度为95%乙醇按质量体积比为1g：2mL比例加入质量浓度为95%乙醇进行提取，然后在转速为70rpm的条件下搅拌5min，再180W超声处理30min，然后在真空度为0.06MPa的条件下真空抽滤，得到提取液，再将提取液在3000rpm、25℃的条件下离心15min，取上清液；然后在0.08MPa、60～70℃的条件下减压浓缩至上清液总体积的30～40%，得到浓缩液，再真空冷冻干燥，得到鞣花酸和没食子酸，即完成香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸。

2.根据权利要求1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的步骤a中培养7天的培养条件为28℃下静置培养。

3.根据权利要求1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的锯木屑为水曲柳、白榆和大青杨的碎木屑，其中水曲柳碎木屑、白榆碎木屑和大青杨碎木屑按1：1：1混合。

4.根据权利要求1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的蓝莓果渣由矮丛蓝莓美登鲜果粉碎而成。

5.根据权利要求书1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的步骤b中的鱼蛋白水解液的制备方法为：将长度为35～40cm的松蒲鲤鱼去皮去骨后切成(2～3)cm×(2～3)cm鱼块，用绞肉机进行处理，得到鲤鱼鱼肉糜，按鲤鱼鱼肉糜与蒸馏水质量体积比为1g：2mL的比例加入蒸馏水，然后加入胰蛋白酶、木瓜蛋白、碱性蛋白酶和中性蛋白酶，用0.2mol/L NaOH调节pH为7，55℃水浴水解4～5h，然后95℃灭酶10min，4层纱布过滤后冷却到25℃即得到鱼蛋白水解液，其中鲤鱼鱼肉糜、胰蛋白酶、木瓜蛋白、碱性蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为1:0.0015:0.0015:0.0015:0.0015。

6.根据权利要求书1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的步骤c中用摩尔浓度为1mol/L的NaOH水溶液调节pH。

7.根据权利要求书1所述的一种香菇菌丝固态发酵蓝莓果渣制备鞣花酸和没食子酸的方法，其特征在于所述的步骤二中真空冷冻干燥的冷阱温度为-70～-75℃，真空度≤2.0Pa。