[发明专利]固载化型β-环糊精衍生物类手性固定相的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种手性固定相的制备方法，具体地说是对β-环糊精衍生物采用硅烷偶联剂缩合的方法将β-环糊精衍生物固载到氨丙基硅胶表面，制备固载化型β-环糊精衍生物手性固定相，适用于高效液相色谱领域。

背景技术

手性是一种普遍存在于自然界生物体中的现象，手性化合物的不同光学异构体之间其物理化学性质几乎完全一致，但是在与生物体相互作用时却往往表现出差异性，特别是在医药领域中，光学异构体之间所体现出来的药效、毒性的差异更为显著。因此，有必要对手性药物的各个对映体分别考察，了解不同对映体的生理活性，以便达到高效、安全的目的。但是常规的分离方法很难分离光学异构体，采用色谱分离的方法可以有效的解决这种问题，其中高效液相色谱（HPLC）法就是一种简便、快速、高效的分离对映体的方法，为此研究一种具有稳定性好、分离能力高的高效液相色谱手性固定相（CSP）具有一定的实际应用价值。

环糊精因为其特殊的空间结构，作为一种新型手性固定相受到越来越多的关注。环糊精类手性固定相的固定方式主要有涂覆型和键合型。涂覆型是将环糊精衍生物涂覆在氨丙基硅胶表面，其具有表面有效分离物质较多的优点，但是对极性流动相及添加剂的使用比较敏感，限制了涂敷型环糊精衍生物手性固定相的使用（Ryo Aburatani et al.Optical Resolving Ability of3,5-Dimethylphenylcarbamates of Oligosaccharides and Cyclodextrins.Bull.Chem.Soc.Jpn.,1990,63:3606-3610.）。键合型环糊精类手性固定相是用间隔臂分子将衍生化的环糊精通过共价键直接键合在硅胶表面（周爱玲等，新型衍生化β-环糊精键合硅胶手性固定相的合成与性能研究，高等学校化学学报，2003,（9）：1610-1614；Tihamer Hargitai et al.Preparation and chromatographic evaluation of3,5-dimethylphenyl carbamoylatedβ-cyclodextrin stationary phases for normal-phase high-performance liquid chromatographic separation of enantiomers.Journal of Chromatography,1993,628:11-22；Berthod A et al.β-Cyclodextrin chiral stationary phases for liquid chromatography:Effect of the spacer arm on chiral recognition.Talanta,1993,40:1367-1373.），或者是通过“click chemistry”反应将环糊精衍生物键合在硅胶表面（梁鑫淼等，专利公开号：CN101306354A；Yong Wang，et al.“Click”immobilized perphenylcarbamated and permethylated cyclodextrin stationary phases for chiral high-performance liquid chromatography application.Journal of Chromatography A,2010,1217:5103–5108）。但是键合型环糊精类手性固定相通常存在反应步骤多、键合效率低等缺点，使硅胶表面具有手性识别能力的物质少且空间规整度不高，另外间隔臂分子的存在增加了非手性识别作用，从而降低了键合型环糊精手性固定相的手性分离能力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种键合效率高、反应步骤简单、手性分离性能良好的固载化型β-环糊精衍生物类手性固定相的制备方法。

本发明的固载化型β-环糊精衍生物类手性固定相的制备方法为：

（1）β-环糊精衍生物的制备：以β-环糊精为原料，将其溶解在无水吡啶中，β-环糊精的质量分数为10-20%，然后将β-环糊精羟基摩尔数0.1-0.3倍量的异氰酸丙基三乙氧基硅烷加入其中，氮气氛下保持60-100℃恒温反应12-20h，再分别与β-环糊精羟基摩尔数1-3倍量的含有苯基基团的异氰酸酯在60-90℃反应24-48h，即生成含有苯基氨基甲酸酯基团的β-环糊精衍生物，用100-200倍体积当量的甲醇与水的体积比2-4：1的溶液进行沉淀，洗涤，最后60-80℃真空干燥至恒重；