[发明专利]固相合成胰高血糖素

权利要求书

1.一种胰高血糖素的固相合成方法，所述方法包括步骤：

以固相合成树脂为起始原料，采用Fmoc/t-Bu固相合成策略依次连接保护氨基酸或多肽，得多肽树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽，其特征在于，所述多肽合成温度不限于常温下进行，所述Fmoc保护氨基酸为Fmoc保护氨基酸单体或Fmoc保护二肽。

2.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述方法中2-28#胰高血糖素合成在35-80℃下进行。

3.如权利要求2所述的合成方法，其特征在于，所述方法中2-28#胰高血糖素合成在50-80℃下进行。

4.如权利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述方法中2-28#胰高血糖素合成在60-80℃下进行。

5.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述方法中1#胰高血糖素合成在常温下进行；较佳地，1#胰高血糖素合成在15-25℃下进行。

6.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，可采用伪脯氨酸保护二肽进行氨基酸缩合反应；所述伪脯氨酸二肽可以是Fmoc-Gly-Thr(ψ^Me,Me Pro),Fmoc-Thr(tBu)-Ser(ψ^Me,MePro),Fmoc-Tyr(tBu)-Ser(ψ^Me,MePro),Fmoc-Asp(OtBu)-Ser(ψ^Me,Me Pro)中的一种或多种。

7.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，脱去一个Fmoc-保护基团的时间为20秒-4分钟。

8.如权利要求7所述的合成方法，其特征在于，连续两次脱去Fmoc-保护基团，一次进行20-40秒，一次2-4分钟。

9.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述接肽反应时间为每次5-25分钟。

10.如权利要求1所述的合成方法，其特征在于，依次连接具有Fmoc保护基团的氨基酸，获得保护的二十九肽树脂，依次包括如下步骤：

(a)装载Fmoc-Thr(tBu)-Wang树脂；

(b)在35-80℃下，用含有DMF的溶液连续两次进行脱保护处理，然后树脂用DMF洗涤；

(c)在35-80℃下在DMF中使用DIC/HOBt进行接肽反应，然后再加入脱保护剂处理，再加入具有Fmoc保护基团的氨基酸，如此重复，获得多肽树脂。