[发明专利]一种硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析检测领域，涉及一种硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法。

背景技术

硼替佐米，化学名：[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪羧基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，外文名(或)通用名：Bortezomib(商品名：万珂)，分子式：C₁₉H₂₅BN₄O₄，其化学结构式如下：

硼替佐米(Bortezomib)是由美国Millennium制药公司研发的新型抗肿瘤药物。近年来研究证实，硼替佐米作为蛋白酶体抑制剂，可在多种肿瘤细胞株和癌变细胞中诱导凋亡，显著增强某些化疗药物和离子化放疗等方法诱导肿瘤细胞凋亡的疗效，而对于正常细胞的毒性作用相对较小。硼替佐米是一种合成的高选择性26S硼酸盐蛋白酶体抑制剂，除多发性骨髓瘤(Muhiplemyeloma，MM)外，美国食品药品管理局(FDA)还于2006年底批准其在套细胞淋巴瘤的使用。同时在其它类型浆细胞疾病、急性髓系白血病及某些实体瘤的治疗上，硼替米佐也被报道有令人瞩目的疗效。因此，硼替佐米正在成为肿瘤治疗的重要药物。

硼替佐米为手性药物，采用立体专属性的分析方法严格控制产品的光学纯度，并制定合理可行的对映异构体杂质的限度,是硼替佐米质量控制的重要部分，对促进其临床应用具有重要的现实意义。目前，尚未有准确灵敏地检测硼替佐米中对映异构体含量的有效方法的公开。

中国专利申请CN101531602A（公开日2009.09.16）中公开了一种HPLC法分析分离酒石酸福莫特罗中间体的方法，其选用纤维素类手性柱OJ-H，以正己烷-无水乙醇-乙二胺为流动相。中国专利申请CN101464431A（公开日2009.06.24）中公开了一种HPLC法分析分离米格列奈钙中间体及其对映异构体的方法，采用环糊精类手性柱如CYCLOBOND I2000，以离子对试剂如四丁基氢氧化铵和磷酸盐如磷酸氢二钠/磷酸为流动相。CN101042381A（公开日2007.09.26）公开了一种地舍平的对映异构体的HPLC测定法，其采用kromasil100-5-DMB为填充剂，以含1%醋酸的二氯甲烷与己烷铵38：62的比例为流动相。CN101206201A（公开日2008.06.25）公开了一种分离测得氯法拉滨及其对映异构体的HPLC方法，其采用C18色谱柱，以磷酸二氢钾溶液与乙腈或者磷酸二氢钾溶液与甲醇为流动相。CN101271087A（公开日2008.09.24）中公开了一种分离测定地西他滨及其对映异构体的HPLC法，其采用硅胶柱，以正己烷：乙醇：三乙胺=50：50:0.1%为流动相。

可见，对于药品的对映异构体的分离检测，所选用的色谱柱、流动相等条件各有差异。色谱条件的选择是结合化合物本身性质、流动相的极性及他们的相互作用等因素，进行综合考量，选择适合待检样品的方法的过程。不同化合物的HPLC检测条件之间并没有明确的参考意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种用硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法，该方法灵敏度高、分离度良好、结果准确可靠，适合用于硼替佐米及其制剂产品的光学质量控制。

本发明提供的硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法，采用纤维素类涂覆型手性色谱柱，以正己烷-低级醇混合溶液-低级醇胺为流动相对硼替佐米的对映异构体进行分离测定。

所述纤维素类涂覆型手性柱优选为OZ-H手性色谱柱。

所述流动相优选为正己烷-甲醇-乙醇-乙醇胺，其体积比优选为88～92：5：3～7：0.8～0.12，更优选地为90：5：5：0.1。

优选地，在所述分离检测方法中，有如下任选的色谱条件：

流动相流速为0.8～1.2ml/min，优选为1.0ml/min；和/或

色谱柱温度为30～40℃，优选为35℃；和/或

检测器采用紫外检测器，检测波长为270nm。

在一种优选的实施方式中，所述分离检测方法的色谱条件包括：色谱柱为OZ-H手性色谱柱，检测器采用紫外检测器（UV），流动相为正己烷-甲醇-乙醇-乙醇胺(88～92:5:3～7:0.8～0.12)，色谱柱温度为30～40℃，流速为0.8～1.2ml/min，检测波长为250～280nm。