[发明专利]一种羟基肉桂酸胺类化合物及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，更具体而言，涉及一类羟基肉桂酸胺类生物碱及其制备方法，以及在制备治疗COMT酶相关疾病的药物，特别是作为一些容易被COMT代谢而降低活性的药物的辅助药的应用。

背景技术

COMT是人体内一种重要的酶，它的活性与众多药物的代谢相关。如，治疗帕金森病的左旋多巴胺，容易被COMT酶代谢为3-氧位-甲基多巴（3-OMD），这使左旋多巴的生物利用度降低，并减少了脑内可利用的左旋多巴总量。为了提高左旋多巴类的生物利用度，需要将该类药物与COMT酶抑制剂同时使用。早前的报道中，诺华制药研发的恩他卡朋片就具有抑制COMT酶活性，提升左旋多巴等药物的生物利用度的作用。但服用恩他卡朋以后，容易让人产生幻觉、眩晕、腹痛、腹泻等不良反应。为了提高左旋多巴类药物的生物利用度，同时减少联合用药带来的副作用，开发新型的COMT酶抑制剂尤为重要。

羟基肉桂酸胺类化合物是一类重要的含酚羟基的化合物，由于其独特的结构，可能具备抗COMT酶的活性。但它在生物体内的合成往往伴随一些极端条件，如植物受损，缺氧等。塘沽特山莨菪是50种基础传统医药之一，是近年在西藏和青海民间调查发掘的镇痛药物。由于其极端的生长环境（缺氧、高寒等），产生羟基肉桂酸胺化合物的可能性较大，故本发明以该药材为主要研究对象，进行羟基肉桂酸胺化合物的发现和活性筛选。

发明内容

本发明的一个目的是提供如式（1）和（2）所示的羟基肉桂酰胺类生物碱或其生理上可接受的盐。

化物：

其中，R1，R2，R3，R4，R5，R6各自独立地为H、OH、C1-C6直链或支链烷基、C3-C6环烷基或含羰基的环烷基、C1-C6卤代直链或支链烷基、C1-C6酰基、甲氧基、芳香基、糖基（如葡萄糖、果糖），或R3和R2，R4和R5，R3和R4，R5和R6连接形成-CH2-,-O-;优选，本发明的羟基肉桂酰胺类生物碱为下表中1～20所示的化合物

所述羟基肉桂酸胺类生物碱的药理学上可接受的盐为上述羟基肉桂酸胺类生物碱与盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸或谷氨酸所成的盐，或其钠盐、钾盐、钙盐以及镁盐所成的盐中的一种或二种以上。

本发明的羟基肉桂酰胺类生物碱或其生理上可接受的盐，既可从山莨菪、烟草等植物中提取分离得到，也可以用廉价的天然或合成得到。

本发明的目的之一提出三类羟基肉桂酸胺化合物的分离制备方法。

1）将含羟基肉桂酰胺类化合物的植物（如山莨菪、卷柏、番茄、番薯、枸杞等），用体积浓度5%-100%乙醇在0-100℃之间提取，每次提取10-300分钟，共提取1-3次，合并提取液，得总提取液1000-2000升，在0-80℃下浓缩至40-80升，提取液用非水SPE方法处理；

非水SPE方法处理过程具体为，取硅胶基质的强阳离子交换（SCX）SPE柱，用纯甲醇活化、平衡，取上述提取液（粗碱溶液）上样；用甲醇清洗SPE柱以除去粗碱中的非生物碱；最后用大于0至250毫摩尔/每升的高氯酸铵-甲醇溶液洗脱生物碱；最后，得到山莨菪的生物碱富集片段，该片段所含的非生物碱极少，极大的简化了山莨菪中生物碱的定量分析过程并提高了定量的准确度；

2）以粒径5-10微米的XCharge C18硅胶键合固定相为色谱填料，以乙腈（A）和200毫摩尔/每升的硫酸钠水溶液(pH2.3)(B)和纯水(C)为流动相，将生物碱富集片段进行梯度洗脱；洗脱梯度（V/V）为：0-30分钟，5%-15%A，10%B；30-40分钟，15-60%A，10%B，其余为水；收集一维片段，并用质谱鉴定，纯度在85%以上的化合物不用进行二维制备，脱盐即可得纯化合物，纯度低于85%的一维片段进行二维制备；

二维制备中，以粒径5-10微米的XCharge SCX硅胶键合固定相为色谱填料，以乙腈（A）和100毫摩尔每升的磷酸二氢钠水溶液(pH2.8)(B)和纯水(C)为流动相，进行梯度洗脱；洗脱梯度（V/V）为：0-30分钟，5%-50%A，30%B，其余为水；收集二维片段，用质谱鉴定，纯度在85%以上的化合物不用进行三维制备，脱盐即可得纯化合物，纯度低于85%的一维片段进行三维制备