[发明专利]以c-Cbl蛋白环状功能域为靶点的潜在药物的高通量筛选系统和筛选方法

权利要求书

1.氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3任意一项所示的多肽。

2.一种以c-Cbl蛋白环状功能域为靶点的潜在药物的高通量筛选系统，其特征在于：包括荧光标记多肽和c-Cbl环状功能域蛋白，二者的摩尔比为1～2:5～30，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3任意一项所示。

3.根据权利要求2所述的筛选系统，其特征在于：所述荧光分子为异硫氰酸荧光素或四甲基罗丹明。

4.根据权利要求2所述的筛选系统，其特征在于：所述荧光标记多肽中，荧光分子与多肽的摩尔比为1:1。

5.根据权利要求2所述的筛选系统，其特征在于：所述荧光标记多肽中，荧光分子标记在多肽N端。

6.一种以c-Cbl蛋白环状功能域为靶点的潜在药物的高通量筛选方法，其特征在于：它是以c-Cbl环状功能域蛋白为靶标，以荧光标记的多肽为配基，采用极化荧光技术筛选以c-Cbl蛋白环状功能域为靶点的潜在药物，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3任意一项所示。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）取SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的多肽，用荧光分子标记，得荧光标记多肽，在温度低于35℃的条件下，与c-Cbl环状功能域蛋白混合，得混合溶液；

（2）取待测样品，梯度稀释，在温度低于35℃的条件下，分别与步骤（1）中混合溶液混合，测定极化荧光值，并计算亲和度；

（3）根据亲和度，判断待测化合物是否为以c-Cbl蛋白环状功能域为靶标的潜在药物。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述荧光分子为异硫氰酸荧光素或四甲基罗丹明。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述荧光标记多肽中，荧光分子与多肽的摩尔比为1:1。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述荧光标记多肽中，荧光分子标记在多肽N端。

11.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述混合溶液中，荧光标记多肽的浓度为100～200nM，c-Cbl环状功能域蛋白的浓度为0.5～3μM。

12.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，待测样品的浓度为2mM，梯度稀释后，与混合溶液以体积比1：19混合。

13.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）和步骤（2）中，所述温度不高于30℃。