[发明专利]激酶Lats2在调控前体脂肪细胞增殖中的应用

权利要求书

1.激酶Lats2在调控动物脂肪细胞增殖中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用为过表达激酶Lats2，激活Hippo信号通路，抑制动物脂肪细胞增殖。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述脂肪细胞为前体脂肪细胞。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述动物为哺乳动物；优选地，所述动物为小鼠、牛或羊。

5.一种过表达激酶Lats2的小鼠前体脂肪细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）提取小鼠大脑组织RNA，反转录成cDNA，以cDNA为模板，以引物F1和R1为引导进行PCR扩增，获得Lats2基因；

引物F1：AGATCTATGAGGCCAAAGACTTTTCC；

引物R1：CTCGAGTTACACGTACACCGGCTGGC；

（2）将Lats2基因克隆至表达载体pPB-CAG-EBNXN，获得重组表达载体pPB-CAG-EBNXN-Lats2；

（3）将重组表达载体pPB-CAG-EBNXN-Lats2转染小鼠前体脂肪细胞，药物筛选得到稳定整合Lats2的细胞，即得到过表达激酶Lats2的小鼠前体脂肪细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，PCR扩增的反应体系为50微升KOD高保真酶PCR扩增体系：

PCR扩增的反应程序为：94℃预变性2分钟；94℃变性30秒，62℃退火30秒，72℃延伸3分钟，重复30次；72℃延伸7分钟。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，重组表达载体pPB-CAG-EBNXN-Lats2的制备方法为将步骤（1）中的PCR产物与表达载体pPB-CAG-EBNXN分别进行BglII和XhoI双酶切，PCR产物目的片段和表达载体pPB-CAG-EBNXN骨架的酶切产物分别回收后用T4 DNA连接酶连接，得到重组表达载体pPB-CAG-EBNXN-Lats2。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述药物筛选为嘌呤霉素药物筛选。

9.激酶Lats2在减少动物脂肪沉积，提高瘦肉率中的应用。

10.激酶Lats2在动物优化遗传育种中的应用。