[发明专利]一种人胰岛素酯的制备方法

权利要求书

1.一种人胰岛素酯的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）从含有desB₃₀人胰岛素的溶液，离心或抽滤得到desB₃₀人胰岛素含水粉末；

（2）使用desB₃₀人胰岛素含水粉末进行转肽反应，得到人胰岛素酯；其中，desB₃₀人胰岛素在转肽反应体系中的终浓度为13mM～33mM。

2.根据权利要求1所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：步骤（1）中所述的离心或抽滤之前，先对含有desB₃₀人胰岛素的溶液进行沉淀。

3.根据权利要求2所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的对含有desB₃₀人胰岛素的溶液进行沉淀的方式为调节pH值之后静置沉淀，或是先加入Zn²⁺，再调节pH值，之后静置沉淀。

4.根据权利要求3所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的pH值为5.6～6。

5.根据权利要求3所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的Zn²⁺的用量按desB₃₀人胰岛素与Zn²⁺的摩尔比为1：0.5～1.5进行计算添加。

6.根据权利要求3所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的静置的温度为4～8℃。

7.根据权利要求1所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：步骤（2）中所述的转肽反应包括如下步骤：用二甲基亚砜溶解苏氨酸或其衍生物，以及desB₃₀人胰岛素含水粉末，再加入1,4-丁二醇和胰蛋白酶水溶液或是只加入胰蛋白酶水溶液，获得转肽的反应体系；然后搅拌进行反应；desB₃₀人胰岛素与苏氨酸酯或其衍生物的摩尔比为1：15～150，desB₃₀人胰岛素与胰蛋白酶按质量比为10～120：1。

8.根据权利要求7所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的苏氨酸酯为o-叔丁基醚-l-苏氨酸叔丁酯；所述的衍生物指的是o-叔丁基醚-l-苏氨酸叔丁酯盐类衍生物。

9.根据权利要求7所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的反应体系中溶剂的比例为二甲基亚砜：1,4-丁二醇：水按体积比15%～50%：0～65%：20%～50%；其中水的含量中包含了desB₃₀人胰岛素含水粉末中包含的水分。

10.根据权利要求7所述的人胰岛素酯的制备方法，其特征在：所述的搅拌反应的时间为1～8小时，温度为25±1℃。