[发明专利]表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒/基因组质粒及其抗肿瘤治疗的应用

权利要求书

1.一种表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒，其特征在于：它是基于新城疫病毒Italien株的基础上构建的重组新城疫病毒；该病毒可以选择性杀伤人肿瘤细胞，并且同时表达人源化嵌合抗体cHAb18。

2.一种可以用于体外复活权利要求1所述的重组新城疫病毒的新城疫病毒基因组质粒，其特征在于：它是由从稳定表达人源化嵌合抗体cHAb18的工程细胞系CHO-TS28中获得该抗体轻、重链的编码基因，通过overlap PCR的方法获得cHAb18轻重链基因融合片段序列，并且在其上下游分别加入病毒转录调控序列；得到人源化嵌合抗体cHAb18抗体转录盒片段，再将该片段插入pBR-rNDV质粒中，获得重组新城疫病毒基因组质粒pBR-rNDV-18HL。

3.根据权利要求1所述表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒，其特征在于：所述重组病毒基因序列的cDNA序列是序列表<400>1的序列。

4.根据权利要求2所述表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒基因组质粒，其特征在于：所述新城疫病毒基因组质粒pBR-rNDV-18HL全长序列是序列表<400>2的序列。

5.根据权利要求2所述表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒基因组质粒，其特征在于：所述cHAb18轻重链基因融合片段序列是序列表<400>3的序列。

6.一种表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒的复活方法，该方法包括：将pBR-rNDV-18HL、pcDNA-NP、pcDNA-P和pcDNA-L共同转染能够稳定表达T7RNA聚合酶的细胞，获得复活的重组病毒rNDV-18HL。

7.一种表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒的纯化方法，其特征在于：该方法采用噬菌斑纯化的方式对重组病毒进行纯化。

8.一种表达人源化嵌合抗体cHAb18的重组新城疫病毒用于抗肿瘤研究和治疗的应用，其特征在于：该病毒感染肿瘤细胞后能表达人源化嵌合抗体cHAb18，人源化嵌合抗体cHAb18能够特异性封闭肿瘤相关抗原分子CD147，抑制肿瘤细胞和间质细胞表达和分泌基质金属蛋白酶，从而抑制肿瘤细胞的运动和侵袭能力；同时病毒自身复制可以干扰肿瘤细胞的正常代谢，引起细胞间融合并最终死亡，达到杀伤肿瘤细胞的目的。