[发明专利]样品垫处理液、H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验领域，特别是涉及一种样品垫处理液、H7亚型禽流感胶体金试纸条及其制备方法。

背景技术

目前存在的试纸条，样品垫的处理液常见成分主要是封闭物质（如：牛血清白蛋白、酪蛋白）和表面活性剂（Tween-20、S-17、S-9、Triton X-10），其中，常用的蛋白质类（如：牛血清白蛋白），其具有流动封闭和保护金标抗体的作用；屈立通X–10、吐温-20表面活性剂可提高亲水性和润湿性，降低液体的表面张力，有利于检测样品中的抗原和试纸条中的金标抗体快速充分的反应，而湿润性效果取决于表面活性剂与其它聚合物基质的配伍性；然而，不同成分的配伍及其含量会直接影响样品垫的作用效果；再者，由于样品在酸性条件下变化较大，其在流动过程中捕捉抗体表面产生正电荷，这将引起与带有负电荷的金标粒子发生非特异性反应，如果样品中含有大量的酸性物质或者含有带有大量正电荷的蛋白质，它们在到达捕捉抗体区之前很可能与金标颗粒非特异性结合，从而使得试纸条检测的灵敏性降低，产生不良的交叉反应。

自2013年2月以来，我国上海市、安徽省、江苏省先后发生不明原因重症肺炎病例，并确诊为人感染H7N9亚型禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病，截至2013年5月29日全国人感染H7N9禽流感确诊病例共计132例。H7亚型禽流感病毒属于禽流感病毒属，正粘病毒科，单股负链RNA病毒。禽流感病毒根据其膜蛋白血凝素（Hemagglutinin，HA）抗原性可分成不同的亚型，目前共有16种HA亚型（H1-H16），其中H7亚型禽流感病毒属于高致病力禽流感病毒之一。现今，发现可感染人的H7亚型禽流感包括H7N2、H7N3、H7N7和H7N9，因此，H7亚型禽流感对人类健康造成了重大威胁。

然而，目前针对禽流感病毒的检测，需要昂贵的仪器设备，检测成本较高，必须有专门的实验室以及专业的操作人员；因此受检测地点、检测仪器和专业人员操作条件限制，不适用于在机场、口岸、火车站、医院等人口密度大、人流量大的场所；也不适用于设备简易的基层社区、血站、边境检验检疫或家庭的现场即时检测；且操作较繁琐，检测周期长，仅检测反应就耗时120min，不能满足样品量多和即时检测的需求，直接影响疫情的防控速度;且并未有检测H7亚型禽流感病毒的试纸条，因此，建立简便快速检测H7亚型禽流感病毒的方法至关重要，有助于监控和预防其传播。

发明内容

基于此，本发明的目的在于提供一种样品垫处理液、H7亚型禽流感胶体金试纸条及其制备方法。

解决上述技术问题的具体技术方案如下：

一种样品垫处理液，所述处理液的配方为：聚乙二醇-2008-20g；聚乙烯吡咯烷酮11-25g；牛血清白蛋白10-45g；屈立通X–1000.5-30ml；吐温-200.8-15ml；最后用5mM-10mM磷酸盐缓冲液定容至1L，调节pH值9.5。

在其中一些实施例中，所述处理液的配方中聚乙二醇-20017-19g；聚乙烯吡咯烷酮18-22g；牛血清白蛋白13-17g；屈立通X–1001.5-2.5mL；吐温-207-9mL。

在其中一些实施例中，所述处理液的配方中还包括叠氮钠0.1-1.1g。

一种H7亚型禽流感病毒胶体金试纸条，所述试纸条由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜和吸水纸顺次搭接粘贴在底板构成，所述样品垫用上述处理液进行处理；所述玻璃纤维膜涂有胶体金颗粒标记的H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜包括检测区和质控区，所述检测区包被有H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体，所述质控区包被有抗鼠IgG抗体。

在其中一些实施例中，所述胶体金颗粒标记的H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体的浓度为25-30μg/ml，在所述玻璃纤维膜上的用量为25.5-45.5μg/cm²。

在其中一些实施例中，所述胶体金颗粒标记的H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体的浓度为26-28μg/ml，在所述玻璃纤维膜上的用量为38-42μg/cm²。

在其中一些实施例中，所述H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体在所述检测区的用量为0.244-0.390μg/mm；所述抗鼠IgG抗体在所述质控区的用量为0.122-0.55μg/mm。

在其中一些实施例中，所述H7亚型禽流感病毒外膜血凝素抗原的单克隆抗体在所述检测区的用量为0.3-0.34μg/mm；所述抗鼠IgG抗体在所述质控区的用量为0.4-0.5μg/mm。