[发明专利]一种向树突状细胞DC靶向加载肿瘤抗原肽的方法无效
申请号: | 201310267563.2 | 申请日: | 2013-06-28 |
公开(公告)号: | CN103409451A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 胡伟明;夏冰 | 申请(专利权)人: | 扬州维克斯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N5/0784;C07K19/00 |
代理公司: | 扬州市锦江专利事务所 32106 | 代理人: | 江平 |
地址: | 225101 江苏省扬州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 树突 细胞 dc 靶向 加载 肿瘤 抗原 方法 | ||
1.一种向树突状细胞DC靶向加载肿瘤抗原肽的方法,其特征在于:利用抗DEC-205分子的抗体基因与编码肿瘤抗原肽MUC1的基因体外重组和表达,获得与树突状细胞DC表面DEC-205受体分子高效结合的融合蛋白V,得到对树突状细胞靶向加载的肿瘤抗原肽MUC1。
2.根据权利要求1所述向树突状细胞DC靶向加载肿瘤抗原肽的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将抗DEC-205的抗体基因与编码肿瘤抗原肽MUC1的基因在体外合成并重组,得到保藏号CGMCC为 NO:7686的表达质粒pET41a-antiDEC-ScFV;
2)将表达质粒pET41a-antiDEC-ScFV转入大肠杆菌,经过诱导,得到表达融合蛋白V前体;
3)将融合蛋白V前体经过变性和复性后,获得具有活性功能的融合蛋白V;
4)采用生物素标记的具有活性功能的融合蛋白V与树突状细胞DC结合,用荧光标记的亲和素来检测对树突状细胞靶向加载的肿瘤抗原肽MUC1。
3.根据权利要求2所述向树突状细胞DC靶向加载肿瘤抗原肽的方法,其特征在于在所述步骤1)中,将抗DEC-205的抗体分子与肿瘤抗原肽MUC1重组在同一融合蛋白中。
4.根据权利要求2所述的向树突状细胞DC靶向加载肿瘤抗原肽的方法,其特征在于在所述步骤2)中,将抗DEC-205分子的抗体基因与编码肿瘤抗原肽MUC1的基因体外重组成的核酸序列,克隆到蛋白表达质粒上,经过诱导在大肠杆菌中表达。
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