[发明专利]一种地锦素的提取与分离方法

说明书

技术领域

    本发明涉及天然产物化学成分的提取技术，具体涉及一种地锦素的提取与分离方法。

背景技术

    地锦草是一年生匍匐草本。茎纤细，近基部二歧分枝，带紫红色，无毛，质脆，易折断，断面黄白色，中空。叶对生；叶柄极短或无柄；托叶线形，通常三裂。全草药用能祛风、解毒、利尿、止血、杀虫、治赤痢，还可配制蛇药；茎叶含鞣质，可提取栲胶。

    地锦草鲜汁、煎剂以及水煎浓缩乙醇提取液对于多种致病性球菌及杆菌有明显抑菌作用，从地锦煎剂干粉中获得乙醇提取物，进一步分离出地锦素，其抗菌作用更强。它对金黄色葡萄球菌、草绿色链球菌和溶血性链球菌、肺炎球菌、卡他球菌、白喉杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌、百日咳杆菌等在0.002-0.63mg/ml时有抑菌作用，0.005-1.25mg/ml时即呈杀菌作用。

    综上所示，可见地锦素的好处很多，但是直至目前，市场还没有研究出从地锦草中提取地锦素的方法。

发明内容

    本发明的目的是提供一种地锦素的提取与分离方法，它对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、各种痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、白喉杆菌、钩端螺旋体等有不同程度的抗菌作用。

为了解决背景技术所存在的问题，本发明采用以下技术方案：

     一种地锦素的提取与分离方法，包括以下步骤：

    （1）提取：将地锦草用水依次按料液比为1:5-6沸腾提取三次，每次2-3小时；

    （2）浓缩：合并水提液浓缩至比重为1.2-1.3；

    （3）醇提：将步骤（2）得到的浓缩液用95%乙醇按料液比为1:4-6常温提取两次，每次1-2小时；

    （4）过滤：将步骤（3）得到的提取液经板框过滤，板框过滤精度为0.2-0.3μm；

    （5）回收乙醇：将步骤（4）得到的滤液经负压高温浓缩，回收乙醇，浓缩至膏状，控制温度不超过80℃，压力≤0.08MPa；

    （6）水沉：将步骤（5）浓缩得到的膏状物用5-8倍量纯化水洗涤三次，每次3-4小时；

    （7）浓缩：将步骤（6）得到的水提液浓缩至比重1.2-1.3，控制温度不超过80℃；

    （8）乙醇二次提取：将步骤（7）得到的浓缩液用95%乙醇按料液比为1:4-6常温提取两次，每次1-2小时。

    （9）过滤：将步骤（8）得到的提取液经板框或膜过滤，板框过滤精度为0.2-0.3μm；

    （10）回收乙醇：将步骤（9）得到的滤液经负压高温浓缩，回收乙醇，浓缩至膏状，控制温度不超过80℃，压力≤0.08MPa；  

    （11）一次萃取：用沸程为60-90℃的石油醚萃取至萃取液为无色，合并上层萃取液，并浓缩回收石油醚，浓缩液体积为浓缩前液体体积的1/12-1/8，浓缩温度不超过60℃；

    （12）二次萃取：将一次萃取得到的浓缩液用丙酮溶解，并逐滴加入氯仿，静置8-10小时后，用三足离心机离心，收集离心液；

    （13）结晶：将步骤（12）得到的离心液再加入等量的氯仿，搅拌后常温静置8-10小时，用三足离心机离心，得到黄色沉淀；

    （14）重结晶：将步骤（13）得到的黄色沉淀用丙酮—氯仿的混合溶液重结晶，混合溶液中丙酮和氯仿的体积比为1:1-1:3，得到黄色针状结晶的地锦素。

　　　本发明具有以下有益效果：本发明制得的地锦素对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、各种痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、白喉杆菌、钩端螺旋体等有不同程度的抗菌作用。本发明工艺步骤简单，易操作，成本低，适用于工业化生产。

具体实施方式

    一种地锦素的提取与分离方法，包括以下步骤：

    （1）提取：将地锦草用水依次按料液比为1:6、1:6、1:5沸腾提取三次，每次2小时；

    （2）浓缩：合并水提液浓缩至比重为1.25；

    （3）醇提：将步骤（2）得到的浓缩液用95%乙醇按料液比为1:5常温提取两次，每次1.5小时；

    （4）过滤：将步骤（3）得到的提取液经板框过滤，板框过滤精度为0.3μm；

    （5）回收乙醇：将步骤（4）得到的滤液经负压高温浓缩，回收乙醇，浓缩至膏状，控制温度不超过80℃，压力≤0.08MPa；