[发明专利]一种检测液体样品中外囊体的方法有效
申请号: | 201310249875.0 | 申请日: | 2013-06-21 |
公开(公告)号: | CN104237168B | 公开(公告)日: | 2017-12-12 |
发明(设计)人: | 胡志远;崔健;王坤 | 申请(专利权)人: | 国家纳米科学中心 |
主分类号: | G01N21/55 | 分类号: | G01N21/55;G01N33/564 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司11283 | 代理人: | 李婉婉,王崇 |
地址: | 100190 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 液体 样品 中外 方法 | ||
1.一种检测待测液体样品中外囊体的方法,所述待测液体样品含有外囊体;所述方法包括:
在微阵列芯片表面通入待测液体样品进行接触,所述微阵列芯片的表面负载有一种或多种外囊体表面膜蛋白的特异性抗体,
获得所述微阵列芯片在接触待测液体样品前后的表面等离子体共振信号变化值;
所述微阵列芯片的表面等离子体共振信号变化值指示了待测液体样品中外囊体的数量;
其中,所述特异性抗体为抗CD9b的特异性抗体或抗CD41b的特异性抗体;所述液体样品为血清或细胞培养上清;
所述微阵列芯片的制备方法包括:分别将所述特异性抗体按0.1-10μg/μL的蛋白浓度固定至镀金芯片或镀银芯片上形成微阵列,每个抗体点中的蛋白量为0.02-2μg。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述微阵列芯片的制备方法还包括:将固定有所述特异性抗体的微阵列芯片在湿度为10-100%,温度为1℃-80℃的条件下孵育0.1-100h。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述待测液体样品的通入速度为0.1-50μL/s,通入的量为100-10000μL。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,所述外囊体来自肿瘤细胞。
5.微阵列芯片在制备用于检测液体样品中外囊体的试剂盒中的用途,所述微阵列芯片的表面负载有一种或多种外囊体表面膜蛋白的特异性抗体,且所述微阵列芯片用于测定表面等离子体共振信号变化值;
其中,所述特异性抗体为抗CD9b的特异性抗体或抗CD41b的特异性抗体;所述液体样品为血清或细胞培养上清;
所述微阵列芯片的制备方法包括:分别将所述特异性抗体按0.1-10μg/μL的蛋白浓度固定至镀金芯片或镀银芯片上形成微阵列,每个抗体点中的蛋白量为0.02-2μg。
6.根据权利要求5所述的用途,其中,所述微阵列芯片的制备方法还包括:将固定有所述特异性抗体的微阵列芯片在湿度为10-100%,温度为1℃-80℃的条件下孵育0.1-100h。
7.根据权利要求5所述的用途,其中,所述外囊体来自肿瘤细胞。
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