[发明专利]胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法无效
| 申请号： | 201310246009.6 | 申请日： | 2013-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN103275927A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 张钰 | 申请（专利权）人： | 广东省实验动物监测所 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735;C12N5/073;C12N11/16 |
| 代理公司： | 东莞市中正知识产权事务所 44231 | 代理人： | 肖哲 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胚胎 干细胞 及其 培养 饲养 细胞 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种新型的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于：所述饲养层细胞采用化学固定的方式制备。
2.按照权利要求1所述的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于：所述化学固定采用多聚甲醛作为固定剂。
3.按照权利要求1所述的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于：所述化学固定采用戊二醛作为固定剂。
4.按照权利要求1-3中任意一项所述的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）准备注射前将胚胎干细胞接种到饲养层细胞上，贴合度满足后进行一次传代；
（2）注射前1天或注射当天将细胞用酶进行消化，然后离心收集细胞，吸出上清液后加培养基重悬；
（3）冷藏或直接注射。
5.按照权利要求4所述的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于：步骤（1）中贴合度为80%。
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