[发明专利]一种裸花紫珠脱毒微繁方法

权利要求书

1.一种裸花紫珠的脱毒微繁方法，其特征在于裸花紫珠的脱毒微繁方法按以下步骤实现：①外植体消毒，将清洗后的裸花紫珠果实外植体在超净工作台上用质量浓度为75％的乙醇溶液浸泡30～60s后，然后用无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为0.1％的氯化汞溶液消毒12～15min，然后用无菌水冲洗3～5次；②无菌苗培养，将种子从消毒的裸花紫珠果实中剥离出，接种于诱导培养基，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为80～100lx、光照8～10h/d的条件下培养至无菌芽长度为0.5～1.0cm；③微枝培养，将增生的无菌芽一起转接于壮苗培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为50～70lx、光照8～10h/d的条件下培养至无菌芽生长长度为15.0～20.0cm，即为微枝；④增殖培养，将增壮后的微枝切割成带有1个顶芽或1～2个腋芽、且长度为1.0～2.0cm的茎段然后接种于增殖培养基，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为80～100lx、光照8～10h/d的条件下培养，视种苗需求数量可增殖25～30d；⑤生根培养，待微枝生长长度为2.0～3.0cm，转接于生根培养基中进行生根培养，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为80～100lx、光照8～10h/d的条件下培养至裸花紫珠微枝根的生长长度为1.5～2.0cm；⑥炼苗培养，将生根培养的裸花紫珠苗于隐蔽度为15％～20％的荫棚，炼苗7～10d；⑦将经过炼苗后裸花紫珠苗移栽于含10％～15％蛭石，10％～15％牛粪，10％～15％椰糠和55％～70％土壤的育苗杯，即完成裸花紫珠的脱毒微繁；其中步骤②中诱导培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含0.01～0.03mg/L的赤霉素、0.01～0.03mg/L的NAA和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤③中壮苗培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含质量浓度为0.5～1.0％的有机附加物，质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤④中增殖培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含0.5～0.8mg/L的6-BA、0.08～0.1mg/L的NAA和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤⑤中生根培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含0.1％～1.0％的活性炭或0.05～0.1mg/L的NAA和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤②-⑤中所述的改良MS固体培养基由1/2MS培养基，增加75.0～100.0mg/L的肌醇制得；步骤③中所述有机附加物为椰子乳、土豆泥、胡萝卜泥中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠的脱毒微繁方法，其特征在于步骤②中将消毒后的裸花紫珠种子接种于以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含0.01mg/L的赤霉素、0.01mg/L的NAA和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0的诱导培养基。

3.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠的脱毒微繁方法，其特征在于步骤③中，所述壮苗培养基中有机附加物为质量浓度为0.5％的椰子乳或1.5％土豆泥或1.5％胡萝卜泥。

4.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠的脱毒微繁方法，其特征在于步骤④增殖培养中，所述的增殖培养基中包含0.5mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0。