[发明专利]一种检测生物大分子的磁共振免疫传感方法

权利要求书

1.一种检测生物大分子的磁共振弛豫时间免疫传感检测方法，其特征在于：采用聚苯乙烯(Polystyrene，PS)微球作为载体经表面修饰与待测物--抗生物大分子(2)抗原(Ag)的抗体(Ab)偶联而制备成复合富集试剂(PS-Ab)(1)，用超顺磁纳米颗粒(SMP)经表面修饰与Ab偶联而制备成磁弛豫时间传感探针(MRS)(4)，将PS-Ab-Ag(3)与MRS混合，基于PS-Ab-Ag(3)上的Ag与MRS(4)上的Ab发生的特异性免疫反应，引起水溶液中MRS(4)状态(分散或者聚集)发生变化，从而引起磁场均匀性发生改变，进而导致周围水分子质子的横向弛豫时间(T₂)发生显著改变，使检测体系中分散状态的磁颗粒转变为聚集状态或者使聚集状态转变为分散状态，利用T₂状态改变程度(ΔT₂)与Ag含量的函数关系，通过用核磁共振仪测试T₂即实现Ag含量的磁共振弛豫时间免疫传感检测。

2.根据权利要求1所述的复合富集试剂(PS-Ab)(1)，其特征在于：PS微球粒径为200-2000nm，表面修饰有羧基或者氨基；抗生物大分子抗原(Ag)(2)为玉米枯萎病菌或禽流感病毒等生物大分子物质；Ab为抗玉米枯萎病菌或抗禽流感病毒等的抗体。

3.根据权利要求1所述的磁弛豫时间传感探针(MRS)(4)的制备方法，其特征在于：SMP粒径为20-60nm，经N-羟基硫代琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化使SMP与Ab偶联而制备成MRS(4)，SMP与抗体的摩尔比为1∶10-1∶50。

4.根据权利要求2所述的PS-Ab(1)的制备方法，其特征在于：PS微球经使用NHS和EDC进行活化作用后与Ab偶联而制备成PS-Ab(1)，PS微球与Ab的摩尔比为1∶10-1∶50。

5.如利要求1、2、4所述的生物大分子的磁共振弛豫时间免疫传感检测方法及相关试剂的制备方法，其特征是：一方面，PS-Ab(1)可捕获待测Ag；另一方面，被捕获的Ag可与MRS特异性结合，克服免疫反应空间位阻且使结合位点增多，显著改变了T₂。上述两方面均可提高检测Ag的灵敏度。