[发明专利]一种生产β-D-葡萄糖苷酶的工程菌及其应用在审
| 申请号: | 201310217251.0 | 申请日: | 2013-06-03 | 
| 公开(公告)号: | CN104212754A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 | 
| 发明(设计)人: | 杨东辉;陶逸伦;刘树林 | 申请(专利权)人: | 北京大学 | 
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N9/42;C12N15/56;C12P19/14;C12R1/19 | 
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 | 
| 地址: | 100191 北京市海淀区学院*** | 国省代码: | 北京;11 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 生产 葡萄 糖苷酶 工程 及其 应用 | ||
1.将编码SDGBGL蛋白的基因导入大肠杆菌得到的重组菌;所述SDGBGL蛋白为如下(a)或(b)或(c):
(a)序列表的序列1自N末端第20-775位氨基酸残基组成的蛋白质;
(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(c)将(a)或(b)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶活性的由(a)或(b)衍生的蛋白质。
2.如权利要求1所述的重组菌,其特征在于:所述编码SDGBGL蛋白的基因为如下(1)或(2)或(3)或(4)所述的DNA分子:
(1)序列表的序列2自5’末端第58-2328位核苷酸所示的DNA分子;
(2)序列表中序列2所示的DNA分子;
(3)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA序列杂交且编码具有β-葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子;
(4)与(1)或(2)限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有β-葡萄糖苷酶活性的蛋白的DNA分子。
3.如权利要求1或2所述的重组菌,其特征在于:所述编码SDGBGL蛋白的基因通过重组表达载体导入所述大肠杆菌。
4.如权利要求3所述的重组菌,其特征在于:所述重组表达载体为将所述编码SDGBGL蛋白的基因导入pEASY-E1载体得到的重组质粒。
5.如权利要求1至4中任一所述的重组菌,其特征在于:所述大肠杆菌为大肠杆菌Rosetta(DE3)。
6.如权利要求1所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌的保藏编号为CGMCC No.7630。
7.权利要求1至6中任一所述的重组菌在制备β-葡萄糖苷酶中的应用。
8.权利要求1至6中任一所述的重组菌的发酵上清。
9.权利要求8所述发酵上清在制备β-葡萄糖苷酶中的应用。
10.权利要求8所述发酵上清在水解糖苷中的应用。
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