[发明专利]一种制备胸腺法新的固相合成新工艺

权利要求书

1.一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征包括以下步骤：

（1）  在PEG羟基树脂上引入第一个保护氨基酸为Fmoc-Asn(Dmcp)-OH，所述第一个保护氨基酸的侧链酰胺用Dmcp保护，主链羧基在缩合剂的作用下通过酯键与PEG羟基树脂连接；

（2）对树脂上的游离羟基进行封闭；

（3）引入的第一个保护氨基酸的氨基在脱保护试剂作用下脱去Fmoc保护基保护后，引入保护的二肽片段Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-OH，并在缩合剂的作用下进行缩合；

（4）将剩余氨基酸自C端向N端按照Glu至Ser的顺序逐个同树脂上的多肽缩合；

（5）N端第一个氨基酸Ser，在脱去氨基上的保护基后引入乙酰基；

（6）采用裂解试剂使多肽从树脂上裂解下来。

2.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（1）的缩合剂采用HATU/DIEA、HATU/HOAt/DIEA、HATU/DMAP/DIEA、HATU/collidine、HATU/DMAP/Collidine，缩合次数为2次以上，每次缩合时间为2小时至12小时。

3.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（2）的封闭方法为采用形成苯甲酸酯、形成对甲氧基苯甲酸酯或形成甲醚的方式进行，所述形成苯甲酸酯采用的封闭剂为苯甲酸酐/吡啶/DIEA、苯甲酸酐/DMAP/DIEA，或苯甲酰氯/吡啶/DIEA、苯甲酰氯/DMAP/DIEA；所述形成对甲氧基苯甲酸酯采用的封闭剂为对甲氧基苯甲酰氯/吡啶/DIEA、对甲氧基苯甲酰氯/DMAP/DIEA；所述形成甲醚所采用的封闭剂为碘甲烷。

4.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（3）的缩合剂采用HATU/ collidine或HATU/HOAt/collidine。

5.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（4）所述的剩余氨基酸采用下面的保护氨基酸引入：Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu(OtBu)-OH；缩合过程中缩合剂采用HCTU/DIEA，缩合反应所用溶剂为DMF，或采用DMF与DCM的混合溶液；引入的保护氨基酸与缩合剂的摩尔比为1:1，HCTU与DIEA的摩尔比为1:2，引入的保护氨基酸及缩合剂与树脂上锚定氨基酸的摩尔比为10:1。

6.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述脱保护试剂为哌啶/DMF，哌啶与DMF的摩尔比为1:4。

7.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（5）采用乙酸酐/DIEA引入氨基上的乙酰基。

8.根据权利要求1所述的一种制备胸腺法新的固相合成新工艺，其特征在于所述步骤（6）裂解试剂为TFA/H₂O，TFA与H₂O的摩尔比为95:5。