[发明专利]艾塞那肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及艾塞那肽的制备方法。

背景技术

艾塞那肽具有以下的结构：

His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-

Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-

Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-

Pro-Pro-Ser-NH₂

                                        。

艾塞那肽是人工合成的GLP-1（胰高血糖素样肽）类似物，由39个氨基酸组成，分子量为4186.6，艾塞那肽是拟肠降血糖素药，可以模拟葡萄糖依赖性胰岛素分泌增强作用和肠降血糖素其他抗高血糖药作用。

艾塞那肽的氨基酸序列与人类GLP-1部分重叠。艾塞那肽在体外显示可以结合并活化已知的人类GLP-1受体。这就意味着通过包括cAMP（环磷酸腺苷）和/或其他细胞内信号传导机制使葡萄糖依赖性胰岛素合成及胰岛β细胞在体内分泌胰岛素增加。在葡萄糖浓度升高的情况下，艾塞那肽可促进胰岛素从β细胞中释放。体内给药后艾塞那肽模拟GLP-1的某种抗高血糖药作用。

艾塞那肽注射液通过下列作用减少2型糖尿病患者空腹和餐后血糖浓度，从而改善血糖控制。

艾塞那肽具有以下药理作用：

1、葡萄糖依赖性胰岛素分泌

艾塞那肽注射液对胰腺β细胞对葡萄糖的应答性有急性效应，仅在葡萄糖浓度升高的情况下引起胰岛素释放。当血糖浓度下降并接近正常水平时，胰岛素分泌下降。

2、第一相胰岛素反应

在健康个体中，胰岛素大量分泌发生于静脉注射（IV）给与葡萄糖后10分钟内。这种分泌称为“第一相胰岛素反应”，2型糖尿病患者特征性地缺乏这种分泌。缺乏第一相胰岛素反应是由于2型糖尿病患者早期β-细胞受损。给与达到治疗剂量血浆浓度的艾塞那肽注射液能恢复2型糖尿病患者对静脉快速注射葡萄糖的第一相胰岛素反应。与生理盐水比较，用艾塞那肽注射液进行治疗的2型糖尿病患者的第一相胰岛素分泌和第二相胰岛素分泌均明显增加（均ｐ＜0.001）。在t=0min经静脉快速注射葡萄糖（0.3g/kg30秒）前3h开始持续静脉注射艾塞那肽注射液或生理盐水5h，患者接受胰岛素静脉注射6.5h（[t]=-30min时停药）使血糖浓度达到正常水平。

3、胰高血糖素分泌

对于2型糖尿病患者，艾塞那肽能减少高血糖期间胰高血糖素分泌，降低血清胰高血糖素浓度，使肝葡萄糖输出量降低，减少胰岛素需求。但是，艾塞那肽注射液不会损害对低血糖的正常胰高血糖素反应。

胃排空：艾塞那肽注射液可以减慢胃排空，从而减慢食物中的葡萄糖进入循环中的速率。

4、摄食

给与艾塞那肽可以减少动物和人类的食物摄取。

2型糖尿病患者皮下注射艾塞那肽，达到中位血浆浓度峰值的时间为2.1h；皮下注射剂量为10μg的艾塞那肽注射液，艾塞那肽平均峰浓度(Cmax)为211pg/mL，平均曲线下总面积(AUC0-inf)为1036pg·h/mL；在5～10μg的治疗剂量范围内艾塞那肽的暴露（AUC）按比例增加，但Cmax值增加比相应比例少；在腹部、大腿和手臂等部位皮下注射艾塞那肽注射液后暴露量相似。皮下注射单剂量艾塞那肽注射液，艾塞那肽的平均表观分布容积为28.3L；非临床研究显示艾塞那肽主要通过肾小球滤过及随后的蛋白水解而消除；在人类，艾塞那肽的平均表观清除率为9.1L/h，平均终末半衰期为2.4h；艾塞那肽的这些药物代谢动力学特征是非剂量依赖性的；对大多数人，给药后约10h艾塞那肽浓度仍可测。

临床上广泛用于服用二甲双胍、磺脲类、噻唑烷二酮类、二甲双胍和磺脲类联用、二甲双胍和噻唑烷二酮类联用不能有效控制血糖的2型糖尿病患者的辅助治疗以改善血糖控制

国内外关于艾塞那肽制备报道很多，其合成原理基本相同，列如中国专利CN200910104990.2和201110043778.7，所报道的制备方法均采用固相合成法，以氨基树脂为起始原料，以单个Fmoc保护的氨基酸为原料，依次逐个接上氨基酸，然后经过裂解、纯化和冻干，获得艾塞那肽。