[发明专利]一种欧龙胆碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，尤其是涉及一种欧龙胆碱的制备方法。

背景技术

西藏秦艽为龙胆属植物，用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节酸痛，日晡潮热，小儿疳积发热，具有镇静、镇痛、解热、抗炎作用，根含龙胆碱、欧龙胆碱（gentialutine)，异欧龙胆碱（isogentialutine)，西藏龙胆碱等成分。

欧龙胆碱，分子式C₉H₁₁NO，分子量149.19，分子结构式：

。

     通过文献检索，尚未有欧龙胆碱的制备方法披露，尤其是采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱分离制备欧龙胆碱的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种操作简便、污染小的欧龙胆碱的制备方法。

本发明的目的是采用以下技术方案实现的：

一种欧龙胆碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

（1）取西藏秦艽根原料粉碎20-80目，用氨水浸润，干燥后置于超临界CO₂萃取罐中萃取，CO₂流量为1-3ml/min/g原料，选用丙酮做夹带剂，流量为0.2-0.6ml/min/g原料，萃取温度30-60℃，压力15-25Mpa，萃取时间1-4h，解析得萃取物；

（2）上述萃取物用盐酸水溶液溶解，滤液，用纳滤膜进行多级分子截留，所得液体用氯仿萃取，浓缩得粗提物；

（3）上述氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.3）为溶剂系统，按3-8:2-5:3-10混合，取上相做固定相、下相为流动相，采用高速逆流色谱法分离上述粗提物，根据色谱收集流分，减压浓缩干燥即得。

步骤（1）中的氨水为ph=9。

步骤（1）中的超临界萃取条件为：CO₂流量为4ml/min/g原料，萃取温度40℃，压力20Mpa，萃取时间2h。

步骤（2）中的纳滤膜多级分子截留为：先用截留分子量300-1000的中空纤维素膜进行分子截留，透过液再用截留分子量小于100的中纤维素膜浓缩。

采用本方法制备欧龙胆碱，提取效率高，污染小，所得产品含量高，易于工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取西藏秦艽根粉碎40目，取2kg，用ph9的氨水溶液浸润20小时，烘干，置于超临界CO₂萃取罐中萃取，通入CO₂流量为3ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.5ml/min/g原料，在萃取温度45℃，压力23Mpa，萃取时间2h，解析萃取物用0.5%盐酸水溶液溶解，滤液，用：先用截留分子量500的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量100的中纤维素膜浓缩，所得液体用等体积氯仿萃取4次，浓缩得粗提物23g。氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.3）为溶剂系统，按6:3:7混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速3ml/min，主机转速800rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得欧龙胆碱2.1g，经HPLC检测，含量95.7%。

实施例2：

取西藏秦艽根粉碎60目，取2kg，用ph9的氨水溶液浸润10小时，烘干，置于超临界CO₂萃取罐中萃取，通入CO₂流量为4ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.4ml/min/g原料，在萃取温度40℃，压力20Mpa，萃取时间3h，解析萃取物用1%盐酸水溶液溶解，滤液，用：先用截留分子量300的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量小于100的中纤维素膜浓缩，所得液体用等体积氯仿萃取3次，浓缩得粗提物18g。氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.3）为溶剂系统，按3:2:5混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速2ml/min，主机转速900rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得欧龙胆碱1.8g，经HPLC检测，含量98.6%。

实施例3：

取西藏秦艽根粉碎80目，取2kg，用ph9的氨水溶液浸润20小时，烘干，置于超临界CO₂萃取罐中萃取，通入CO₂流量为5ml/min/g原料，丙酮做夹带剂，流量为0.2ml/min/g原料，在萃取温度50℃，压力20Mpa，萃取时间4h，解析萃取物用0.3%盐酸水溶液溶解，滤液，用：先用截留分子量1000的中空纤维素膜分子截留，透过液再用截留分子量小于100的中纤维素膜浓缩，所得液体用等体积氯仿萃取3次，浓缩得粗提物24g。氯仿、甲醇、三乙胺溶液（ph7.3）为溶剂系统，按7:4:9混合，取上相做固定相、下相为流动相，取上相注入高速逆流色谱管做固定相，取下相做流动相，流速2ml/min，主机转速850rpm，流动相溶解萃取物，进样，根据图谱收集流分，连续制备，流分合并浓缩干燥，得欧龙胆碱2.3g，经HPLC检测，含量96.1%。