[发明专利]高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定蜂胶中Artepillin C含量的方法，尤其是涉及一种高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法，属于一种检测蜂胶中的成分的方法。Artepillin C即阿替匹林C，学名为3,5-二异戊二烯基-4-羟基肉桂酸，是巴西绿蜂胶中的标志性成分，具有抗菌和抗肿瘤作用。

背景技术

Artepillin C即阿替匹林C，学名为3,5-二异戊二烯基-4-羟基肉桂酸。

Artepillin C的化学结构式为                                                。

Artepillin C是巴西绿蜂胶中的标志性成分，具有抗菌和抗肿瘤作用，这在黄文诚.蜂胶中的抗菌和抗肿瘤成分——阿替匹林[J].蜂蜜杂志,2002,4:7-8中就有记载。

Artepillin C的检测方法报道不多，主要是HPLC法，针对的仅是巴西绿蜂胶，如韩利文,刘可春,王思锋,等.HPLC法测定蜂胶中阿替匹林的含量[J]. 中国药事,2008,22（4）:312-314中就有记载。但是，由于巴西绿系蜂胶的资源非常有限，基本上都被出口到日本，这在中村博彥.十年了, 我仍然健在……[J].养蜂科技,2003,3:30-36中有记载。

由于巴西绿蜂胶的资源有限，价格高昂，且目前还没有一种用于测定蜂胶中Artepillin C含量的方法，所以在市场上出现了以低价伪劣产品冒充巴西绿蜂胶的现象，如中央电视台新闻频道2010年11月21日播出的每周质量报告中，讲述的是蜂胶里的秘密这期节目，在这一期节目中，就公开了以低价伪劣产品冒充巴西绿蜂胶的现象，这一期节目的具体内容可参见如下网址http://bugu.cntv.cn/news/finance/meizhouzhiliangbaogao/classpage/video/20101121/100757.shtml。

由于Artepillin C是巴西绿蜂胶中的标志性成分，为了蜂胶行业能够积极良性的发展，有必要建立测定蜂胶中Artepillin C含量的方法，适用于中国蜂胶与巴西绿蜂胶中Artepillin C的检验，最终用以鉴别中国蜂胶与巴西绿蜂胶，并定量测定蜂胶制品中巴西绿蜂胶标志性成分——Artepillin C。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，而提供一种简单、快速、准确，检测成本低，节约人力，检测时间短，检测效率高的高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法。

本发明解决上述问题所采用的技术方案是：该高效液相色谱法测定蜂胶中Artepillin C含量的方法的特点在于：该方法包括样品处理工序、标准曲线制作工序和样液测定工序；

所述样品处理工序中，称取粉碎均匀的蜂胶样品0.5g，加入20ml甲醇，超声溶解20min，冷却后，再用甲醇定容至50ml，混匀，静置10min，吸取上清液1-2mL，用体积百分含量为80%的磷酸甲醇液定容至50ml，混匀，过滤，去掉5mL初滤液，取1mL续滤液过0.22μm滤膜，得到样液；