[发明专利]脱甲绿胶酶素在制备β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的用途

说明书

技术领域

本发明属于微生物药物领域，特别涉及一种甾类化合物脱甲绿胶酶素（demethoxyviridin）在制备β-淀粉样蛋白（Amyloid-β，Aβ）聚集抑制剂中的用途。

背景技术

老年痴呆是一种由脑部疾病引起的，以进行性认知功能障碍和记忆损害为特征的中枢神经系统退行性疾病综合征，其表现为智力（包括记忆力、学习能力、方向辨认能力、语言能力、理解能力以及判断力）上的减退。老年痴呆一般常见的有阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）、血管性痴呆病（Vascular dementia，VA）、路易体痴呆病（Dementia with Lewy bodies，DLB）以及额颞痴呆（Frontotemporal dementia，FTD）等4种类型。在所有的痴呆患者中，阿尔茨海默病患者占50～70%，是老年痴呆中最常见的类型。

目前已经上市治疗阿尔茨海默病的药物主要以乙酰胆碱酯酶抑制剂和N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂（NMDA）为主，这些药物能在一定程度上改善患者的痴呆症状，但不能从根本上阻止病情的恶化、逆转病情，因此寻找治疗阿尔茨海默病新的药物十分重要。

关于阿尔茨海默病的发病机制，一般认为Aβ聚集体的形成是引发阿尔茨海默病的重要原因。Aβ由37-42个氨基酸组成，其中Aβ₄₀在人体内产生最多。虽然Aβ₄₂在人体内不多，只有Aβ₄₀的1/99，但Aβ₄₂因能自发聚集，其聚集体毒性更大。因此抑制Aβ₄₂聚集已成为研制阿尔茨海默病治疗药物的重要靶标之一。

目前发现具有抑制Aβ聚集活性的化合物主要有：1）肽类抑制剂，如PPI-1019、SEN-304、SEN606等；2）人工合成的小分子化合物，如Tramiprosate、Clioquinol、Scyllo-inositol、Congo red（刚果红）等；3）植物来源的小分子化合物，如EGCG（表没食子儿茶素没食子酸酯）、α-Mangostin、PGG（1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β-D-glucopyranose）等；4）细菌来源的小分子化合物，如α-D-mannosylglycerate、ectoine、hydroxyectoine等。其中EGCG（NCT00951834）已处于临床Ⅲ期实验阶段。

发明内容

为了解决上述现有技术中存在的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种脱甲绿胶酶素（demethoxyviridin）（结构如下式所示），在制备β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的用途。

本发明的目的通过下述技术方案来实现：

脱甲绿胶酶素在制备β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的用途。

所述β-淀粉样蛋白聚集抑制剂应用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。

所述脱甲绿胶酶素是通过多节孢属真菌（Nodulisporium sp.）65-12-7-1发酵、分离得到；

所述多节孢属真菌65-12-7-1于2013年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7332。

所述脱甲绿胶酶素按以下方法制备得到：

（1）将多节孢属真菌65-12-7-1经斜面活化后接种于PDB培养基，在23～28℃下以180～250r·min^-1振荡培养3～5d，再按照5～10%接种量接种到大米培养基中，26～30℃下静止培养40～50d，得到发酵物；

（2）将发酵物加入乙酸乙酯进行浸泡提取，将提取液减压浓缩至干，得到粗提取物；

（3）粗提取物用体积比90：10的甲醇/水溶液进行悬浮，用等体积的环己烷萃取，得到环己烷萃取层和甲醇/水层部位；然后对甲醇/水层部位进行ODS中低压柱层析，依次用体积比70：30、50：50、30：70和0：100的水-甲醇洗脱，将用体积比30：70的水-甲醇洗脱所得馏分再进行ODS中低压柱层析，依次用体积比80：20、60：40、50：50和0：100的水-甲醇洗脱，对用体积比60：40的水-甲醇洗脱所得子馏分进行HPLC液相制备，得到脱甲绿胶霉素。

步骤（1）所述PDB培养基由以下按重量体积比的组分组成：土豆200g/L，葡萄糖20g/L，纯净水1L。