[发明专利]脱甲绿胶酶素在制备β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的用途无效
申请号: | 201310196180.0 | 申请日: | 2013-05-23 |
公开(公告)号: | CN103316020A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
发明(设计)人: | 高昊;姚新生;郑易之;郭良栋;陈国栋;孙翔;郑启昌;孔明珠;李小霞 | 申请(专利权)人: | 暨南大学 |
主分类号: | A61K31/58 | 分类号: | A61K31/58;A61P25/28 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘晖;陈燕娴 |
地址: | 510632 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脱甲绿胶酶素 制备 淀粉 蛋白 聚集 抑制剂 中的 用途 | ||
1.脱甲绿胶酶素在制备β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述β-淀粉样蛋白聚集抑制剂应用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述脱甲绿胶酶素是通过多节孢属真菌(Nodulisporium sp.)65-12-7-1发酵、分离得到;
所述多节孢属真菌65-12-7-1于2013年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7332。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述脱甲绿胶酶素按以下方法制备得到:
(1)将多节孢属真菌65-12-7-1经斜面活化后接种于PDB培养基,在23~28℃下以180~250r·min-1振荡培养3~5d,再按照5~10%接种量接种到大米培养基中,26~30℃下静止培养40~50d,得到发酵物;
(2)将发酵物加入乙酸乙酯进行浸泡提取,将提取液减压浓缩至干,得到粗提取物;
(3)粗提取物用体积比90:10甲醇/水溶液进行悬浮,用等体积的环己烷萃取,得到环己烷萃取层和甲醇/水层部位;然后对甲醇/水层部位进行ODS中低压柱层析,依次用体积比70:30、50:50、30:70和0:100的水-甲醇洗脱,将用体积比30:70的水-甲醇洗脱所得馏分再进行ODS中低压柱层析,依次用体积比80:20、60:40、50:50和0:100的水-甲醇洗脱;对用体积比60:40水-甲醇洗脱得到的子馏分进行HPLC液相制备,得到脱甲绿胶霉素。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于:步骤(1)所述PDB培养基由以下按重量体积比的组分组成:土豆200g/L,葡萄糖20g/L,纯净水1L。
6.根据权利要求4所述的用途,其特征在于:步骤(2)所述浸泡提取的次数为2~3次;所述乙酸乙酯的加入量为发酵物体积的1~2倍;所述减压浓缩的温度为35~45℃。
7.根据权利要求4所述的用途,其特征在于:步骤(3)所述甲醇/水溶液的用量为每克粗提取物中采用8~20mL。
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