[发明专利]以水为溶媒提取高纯葛根素的方法

说明书

技术领域

本发明属于中约提取制备技术领域，尤其是一种以水为溶媒提取高纯度葛根素的方法。

背景技术

葛根(Radix puerariae)为豆科植物野葛Pueraria lobata(Wiolld)Ohwi的干燥根，其味甘、辛、性平，其主要成分是淀粉，此外还含有约12％的黄酮类化合物，包括大豆(黄豆)甙、大豆甙元、葛根素等10余种；并含有胡萝卜甙、氨基酸、香豆素类等。既是中药材又是营养丰富的食用原料。

葛根具有解痉退热、生津、透疹、升阳止泻等功能。同其它大多数黄酮类化合物相似，葛根黄酮类化合物也具有多种药理功能，如改善血液循环、降血压、降血糖、降血脂、抑制动脉硬化、抗心率失常、抗血小板聚集、抗肿瘤、抗缺氧与抗氧化等。葛根素是从葛根中所提取得到的一种异黄酮类化合物，是葛根总黄酮中的一种。实验证明其有扩张心脑血管，降低心肌氧耗，改善心肌收缩功能和促进血液微循环作用，可用于治疗冠心病、视网膜动、静脉阻塞和突发性耳聋等微循环障碍病。现在葛根黄酮及葛根素因其显著的药用价值己被广泛应用于医药工业、食品工业、日用化工等领域。

近年来，天然植物有效成份因其功效明显、天然低毒等特点倍受青睐，引发了全世界范围使用天然草本植物来预防和治疗各种疾病的热潮。随着对天然植物药材研究的深入开展，葛根的研究范围有了进一步拓展，其中葛根黄酮和葛根素提取及纯化的研究受到了广泛关注，目前葛根总黄酮的提取的主要方法有：(1)醇回流法，主要以水、乙醇、碱性醇、石灰水、甲醇、丙酮等溶媒，加热回流。回流提取2～3次，提取葛根总黄酮；(2)醇渗漉法；(3)浸渍法；(4)微波辅助萃取法；(5)酶解回流法；(6)超声逆流萃取法；(7)离子配位萃取法。

市场对葛根黄酮的需求越来越大。但由于科技投入的不足，国内的葛根黄酮制取技术相对落后，且葛根黄酮和葛根素的提取方法多为有机溶剂提取，生产效率低、能耗大、环境污染严重、杂质含量高，产品缺乏市场竞争力。以水代替有机溶剂做溶媒对葛根黄酮和葛根素进行高纯提取解决了有机残留问题。

通过检索发现两篇与本发明相关的专利文献，其一为葛根素及其提取方法(CN1163127)，主要包括以下步骤：(1)葛根粉碎，水煎煮；(2)浓缩得水浸膏；(3)乙醇沉淀得醇浸膏；(4)聚酰胺柱层析；(5)水洗脱，浓缩；(6)放置析晶得粗品；(7)精制。其二是葛根素提取物的生产方法(CN1927876)，主要包括以下步骤：(1)葛根粉碎水煎煮；(2)离子交换树脂层析；(3)大孔树脂层析；上述专利文献是在葛根素纯化的技术上改进，但与本专利申请的技术方案有本质上的不同。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种以水为溶媒提取高纯度葛根素的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

(1)葛根素提取：将干燥的葛根韧皮部粉碎成粗粉与水混合，于1.5MPa，60℃热浸10h。过滤，滤液备用。再加入等量水于滤渣中，相同温度和压力条件下热浸15h，过滤，反复3次。在真空度＜0.1MPa，45～60℃下将滤液浓缩到10％以上即可得到葛根总黄酮浸膏，有效成分提取率达90％以上；

(2)葛根素纯化：得到的葛根总黄酮浸膏经HPD-600大孔树脂进行吸附、洗脱。洗脱时先用蒸馏水洗去糖类、蛋白质、鞣质等水溶性杂质，然后改用60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩回收乙醇，得到的浸膏配制成水溶解液经AB-8型大孔吸附树脂层析柱进行吸附，用50％乙醇洗脱。收集洗脱液浓缩回收乙醇。

(3)葛根素脱色：洗脱液经三氧化二铝柱脱色，再经减压浓缩至原洗脱液的50％，浓缩液静置24h析出后，抽滤干燥得粗制品。

(4)葛根素精制：粗制品加入壳聚糖反复结晶沉淀，滤液浓缩干燥得到纯度大于99％的葛根素。

而且所述步骤(1)中葛根韧皮部粗粉与水的质量比为1g∶8mL；

而且所述步骤(2)中HPD-600大孔树脂的条件为：径高比为1∶6，上样浓度50mg/mL，最大上样量为3BV，流速为1mL/min，洗脱剂用量5BV；

而且所述步骤(2)中AB-8型大孔吸附树脂层析柱的条件为：径高比为1∶5，上样浓度为15mg/mL，最大上样量为2.5BV，流速为3BV/h，洗脱剂用量2.5BV；

而且所述步骤(4)中粗制品反复结晶沉淀所采用的方法是将粗制品配制成0.1g/mL的溶液，按1∶1的比例加入1％壳聚糖醋酸溶解液，于40℃搅拌15min，然后静置2h，过滤，按上述方法重复3次。