[发明专利]一种提高泰乐菌素A组分的提取方法

说明书

技术领域

本发明属抗生素药物领域，具体涉及泰乐菌素的提取技术，可有效提高泰乐菌素产品中的A组分。

背景技术

泰乐菌素是一种十六元内酯类禽畜专用抗生素，它是由弗氏链霉菌(streptomyces fradiae)在发酵过程中同时获得A、B、C、D四个组分的混合物，其中：A组分为泰乐菌素(Tylosin) ， B组分为脱碳糖泰乐菌素((Desmycosin) ， C组分为大菌素(Macrosin) ， D组分为雷洛菌素(Relomycin) 以及结构类似物拉克亭菌素。以上四个组分中，除雷洛菌素外其它组分在试管内均有抗菌活性，而泰乐菌素A组分在体内证实有较高活性。常见泰乐菌素产品是酒石酸泰乐菌素和磷酸泰乐菌素及泰乐菌素碱。泰乐菌素对革兰氏阳性菌及某些阴性菌（如金黄色葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎双球菌等）以及支原体、弧菌及其他致病因子有很高的活性，是世界公认治疗和预防畜禽支原体感染的首选药物。

目前，国内泰乐菌素的一般提取工艺是：泰乐菌素发酵液预处理后经板框过滤获得发酵滤液，用乙酸丁酯对发酵滤液进行萃取得富含泰乐菌素的有机相，再用酸水进行反萃取，经中和、脱色、浓缩、干燥后得酒石酸泰乐菌素或磷酸泰乐菌素精品。

上述工艺所用的乙酸丁酯是一种优良的萃取剂，对泰乐菌素具有较好的溶解度，但在实际生产中损耗较大。目前有关泰乐菌素萃取溶媒的专利都是从这个角度出发，优化萃取溶媒，降低溶媒损耗。

如专利CN1432575A、CN1374406A通过将泰乐菌素发酵滤液用膜过滤或喷雾干燥浓缩设备浓缩后减少发酵滤液的体积，从而减少所需萃取剂的用量来减少溶媒的损耗。又如专利CN101565438A、CN101565439A采用氯仿和乙酸丁酯复合使用的方式进行萃取，由于氯仿具有更优异的溶解性能，从而减少溶媒的用量。又如专利CN101450959A通过往发酵滤液中加盐的方式，减少泰乐菌素在水中的溶解度，进而减少或完全避免使用溶媒。

另一方面，乙酸丁酯对泰乐菌素及其结构类似物的杂质以及泰乐菌素A、B、C、D各组分之间的分离度并不是很好。上述专利中，无论是发酵滤液浓缩、采用氯仿混合溶媒还是往发酵滤液中加盐的方式，都会因为处理方法问题导致泰乐菌素发酵滤液中的杂质在水中的溶解度下降或在有机溶剂中的溶解度增加，从而增加乙酸丁酯萃取液中的杂质含量，使得产品中泰乐菌素A组分下降。

“发酵异常”是生化药物行业的一个普遍现象，泰乐菌素发酵异常会导致出现杂质含量增多、C组分无法彻底转化、D组分大幅度升高等现象。由于乙酸丁酯对杂质及泰乐菌素C、D的分离性能不好，仅仅采用乙酸丁酯作为萃取剂无法得到符合质量要求的产品。

所以尽管上述各专利方法减少了溶媒损耗并提高了产品收率，但这些方法依然无法满足对泰乐菌素产品质量方面的要求，尤其是在处理“异常发酵”批次时并无太大帮助。因此，一种可以提高泰乐菌素A组分的纯化方法还是很有需要的，本发明所提供的方法可以在一定程度上提高泰乐菌素A组分。

发明内容

针对上述现有技术存在的缺点和不足，发明人旨在提供一种提高泰乐菌素A组分的提取方法，在提高产品收率的同时，一方面解决溶媒损耗问题，一方面解决泰乐菌素发酵异常的问题。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实施的：

一种提高泰乐菌素A组分的提取方法，包括如下步骤：

在泰乐菌素发酵滤液中加入复合溶媒中进行萃取，得到的萃取液（即饱含泰乐菌素的有机相）采用磷酸溶液或酒石酸溶液进行反萃取获得水提液，获得的水提液经中和、脱色、喷雾干燥得到磷酸泰乐菌素或酒石酸泰乐菌素精品或者水提液在吹尽溶媒后加碱调pH值，使泰乐菌素碱从水提液中析出，经离心、干燥获得泰乐菌素碱，其中：所述的复合溶媒为甲苯与乙酸丁酯或乙酸异丁酯混合物，复合溶媒中甲苯比例为70%~95%（V/V），余量为乙酸丁酯或乙酸异丁酯。

研究发现，采用甲苯作为萃取剂分离纯化泰乐菌素可以获得比乙酸丁酯更高的泰乐菌素A组分，且甲苯对于泰乐菌素杂质及泰乐菌素C、D组分具有更高的分离效率。但甲苯对泰乐菌素的溶解度稍差，加入一定比例的乙酸丁酯或乙酸异丁酯形成的复合溶媒，可以增加溶媒对泰乐菌素的萃取能力。通过实验发现，复合溶媒中甲苯的比例越高，溶媒对泰乐菌素A的选择性越好。当复合溶媒中甲苯的比例低于70%时，复合溶媒对泰乐菌素A组分的提高并没有明显的帮助。另一方面，需要加入少量的乙酸丁酯或乙酸异丁酯来改善复合溶媒对泰乐菌素的溶解能力。所以复合溶媒中甲苯的合理比例为70%~95%（V/V），余量为乙酸丁酯或乙酸异丁酯。