[发明专利]解淀粉芽孢杆菌HRH317及其抑菌物质的制备方法有效
| 申请号: | 201310187052.X | 申请日: | 2013-05-20 |
| 公开(公告)号: | CN103589655A | 公开(公告)日: | 2014-02-19 |
| 发明(设计)人: | 郝林;任淑娟;郝利平 | 申请(专利权)人: | 山西农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P1/04;C12R1/07 |
| 代理公司: | 太原晋科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14110 | 代理人: | 郑晋周 |
| 地址: | 030801 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淀粉 芽孢 杆菌 hrh317 及其 物质 制备 方法 | ||
1. 一株解淀粉芽孢杆菌( Bacillus amyloliquefaciens) HRH.317菌株,其特征是:已于2013 年3月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.7314。
2.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌( Bacillus amyloliquefaciens) HRH.317菌株,其特征是,所述的解淀粉芽孢杆菌HRH.317是从田间土壤中分离筛选得到的,在牛肉膏蛋白胨培养基上37℃恒温培养24小时,菌体形成大量芽孢,形成芽孢前菌体杆状,大小为0.9~1.4×2.7~3.9μm,排列为单个或成链,革兰氏阳性;培养3天,菌落形态为:乳白色,直径约为6.75mm、表面不光滑有褶皱,光学特征不透明、有凸起、圆形、边缘呈波状或花瓣状;液体静置培养时,有菌膜生成;穿刺接种培养菌体在试管的培养基内云雾状扩散生长,表明有运动性;将提取所得解淀粉芽孢杆菌HRH.317的16S rDNA序列输入NCBI的GeneBank数据库中,与已知菌株的16S rDNA基因序列进行同源性比对,解淀粉芽孢杆菌HRH.317的16S rDNA序列与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )的同源性达到了99%-100%,从16S rDNA序列的系统进化树显示,解淀粉芽孢杆菌的16S rDNA序列与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens strain BGP20)的相似性最高,经生理生化鉴定,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )。
3.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌( Bacillus amyloliquefaciens) HRH.317菌株,其特征是:所述的牛肉膏蛋白胨基础培养基是由下列质量/体积份的成分组成:牛肉膏0.5份,蛋白胨1份,NaCl 0.5份,琼脂1.5份,蒸馏水100份,培养液的PH值为7.2-7.4。
4. 解淀粉芽孢杆菌HRH.317菌株所产抑菌物质的制备方法,包括如下步骤:
(1)制备发酵液 将解淀粉芽孢杆菌HRH.317菌株接种到灭菌后的发酵用培养液中,在36-38℃、160 r/min条件下,培养20-24小时,得到发酵液;
(2)制备抑菌物质液 将(1)制备的发酵液经5000r/min 离心20 min后取上清液,即得液体抑菌物质。
5.根据权利要求4所述的解淀粉芽孢杆菌HRH.317菌株所产抑菌物质的制备方法,其特征在于,所述的发酵液是由下列质量/体积份的原料组成:牛肉膏 0.5份,蛋白胨1.份,NaCl 0.5份,蒸馏水100份,pH 7.2。
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