[发明专利]一种含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质的创制方法有效
| 申请号: | 201310186965.X | 申请日: | 2013-05-18 |
| 公开(公告)号: | CN103333914A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
| 发明(设计)人: | 黄志伟;郑金贵;程祖锌;许明;林俊城;黄昕颖;杨志坚 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
| 地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 含有 达玛烷型 人参 皂苷 水稻 种质 创制 方法 | ||
1.一种含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质的创制方法,其特征在于其步骤如下:
1) 将达玛烯二醇合成酶基因的全长cDNA,其序列如SEQ ID No.1所示,构建到双T-DNA植物表达载体上,获得重组植物表达载体pCDMAR-DS-hpt;
2) 采用农杆菌介导法,将重组植物表达载体pCDMAR-DS-hpt转化到水稻中,经筛选培育后得到含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质。
2.如权利要求1中所述的含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质的创制方法,其特征在于步骤1)具体的为:从人参属植物中克隆出达玛烯二醇合成酶基因的全长cDNA,其序列如SEQ ID No.1所示;设计合成达玛烯二醇合成酶基因编码序列两端的特异引物,通过PCR扩增,获得该基因的编码区;将该编码区构建到双T-DNA植物表达载体上,获得含有达玛烯二醇合成酶基因编码序列的重组植物表达载体pCDMAR-DS-hpt。
3.如权利要求2中所述的含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质的创制方法,其特征在于步骤1)达玛烯二醇合成酶基因的全长cDNA的来源为:从竹节人参中克隆出达玛烯二醇合成酶基因的全长cDNA,其序列如SEQ ID No.1所示。
4.如权利要求1中所述的含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质的创制方法,其特征在于步骤2)具体为:采用冻融法,将重组植物表达载体pCDMAR-DS-hpt转化到农杆菌LBA4404中,获得了含有达玛烯二醇合成酶基因的重组农杆菌;将获得的重组农杆菌侵染水稻的胚性愈伤组织,经过抗性愈伤组织的筛选、分化和生根培养,及进一步的筛选培育,获得了含有达玛烷型人参皂苷的水稻新种质。
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