[发明专利]透明质酸‑抗肿瘤药偶联物及复合纳米粒组合物的制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及高分子化学领域、药用辅料或药物制剂领域。具体涉及透明质酸-抗肿瘤药物偶联物及复合物纳米粒的制备方法。包括抗肿瘤药物与连接臂偶联，靶向配基透明质酸或其铵盐与抗肿瘤药物-连接臂的制备方法；本发明还涉及具有主动靶头透明质酸-抗肿瘤药物偶联物与两亲性聚酯嵌段共聚物复合纳米粒的组装新技术。 

背景技术

癌症已成为严重威胁人类生命健康的主要疾病之一。由于癌症早期发现及诊断较为困难，化学疗法在临床上发挥着重要作用，但仍存在各种问题和面临挑战，如抗肿瘤药物溶解性差、毒副作用大及耐药性等问题。随着肿瘤学、分子生物学和高分子聚合物的迅速发展，抗肿瘤药物的靶向性输送给药成为研究热点。聚合物-药物偶联物(Polymer-drug delivery system，PDDS)具有许多优势，已发展成为药物传递系统的新型领域。 

聚合物-抗肿瘤药偶联物是小分子药物通过共价键与水溶性聚合物连接，药物偶联物能够显著提高难溶性药物的溶解度，聚合物在体循环中通过简单的水解或酶降解，延长体内血浆中的半衰期，到达靶部位从而发挥药效，尤其重要的是抗肿瘤偶联物具有EPR效应能在肿瘤部位蓄积。主要特点有：(1)提高难溶性药物的水溶性；(2)提高药物肿瘤靶向性前药复合纳米粒具有纳米尺寸，通过肿瘤的EPR效应浓集于肿瘤组织，具有被动靶向性；复合纳米粒的核壳结构灵活多样，可以在高分子表面连接-配体，如糖基(HA)、肽基、叶酸、抗体等，通过配体分子与靶细胞表面受体分子特异作用，增强其对组织及器官的特异性识别，实现主动靶向；(3)实现药物的稳定转运避免物理包埋纳米胶束系统初期突释放问题，将药物带到靶部位并实现智能化释放，从而达到增强药效、减低毒副作用的效果。 

采用生物相容性高分子材料与PTX偶联，构建靶向药物传递系统(DDS)已成为目前的研究热点。偶联物中药物分子通过共价键与聚合物主链相结合，在水性介质中形成核壳型胶束，可增加药物溶解度、提高生物利用度，在血液循环中的稳定性，避免药物到达靶部位前被酶代谢、失活，将药物最大限度地运送到靶部位，降低药物的毒副作用。 

HA是水溶性天然高分子多糖，具有多功能的物理化学和生物学性质，如生物相容性，生物可降解性和免疫原性，能被特定的癌细胞选择性吸收，已广泛应用多元化载体系统。分子链中含有大量活性基团，如羧基、羟基、N-乙酰基和还原末端均可对其化学修饰。主要修 饰方法有酯化、交联、接枝等反应，其中羟基和羧基是常见的共价修饰位点。聚合物-药物偶联物有足够的官能团，从而能进行化学偶联。 

多数恶性肿瘤及其周围基质组织有高浓度的透明质酸(HA)，且过度表达HA受体CD44或RAHMM，如变形乳腺上皮细胞、卵巢肿瘤细胞、结肠癌、肺癌、急性白血病细胞等。以HA为配体构建的偶联物可将被动靶向与受体介导的主动靶向协同，使药物定向聚集在肿瘤部位，改变药物摄取机制，达到主动靶向性。 

Chytil等通过腙键将阿霉素(DOX)和亲水性大分子HPMA共价偶联形成大分子偶联物(HPMA-DOX)，体外细胞毒性实验表明，HPMA-DOX对小鼠T细胞淋巴瘤EL4细胞、小鼠B细胞淋巴瘤38C13细胞、人大肠癌SW620细胞等的毒性均较游离阿霉素强，体内药效学研究表明其抗肿瘤疗效有所提高[Chytil，P.，Etrych，T.，Konak，C.，Sirova，M.，Mrkvan，T.，Rihova，B.，Ulbrich，K.，Properties of HPMA copolymer-doxorubicin conjugates with pH-controlled activation：effect of polymer chain modification.J.Controlled Release.2006，115(1)，26-36.]。Norbedo Stefano等设计合成了一种透明质酸-羟基喜树碱(HA-CPT)偶联物，其对HT-29细胞、H460细胞和H460-M2细胞的毒性较伊立替康明显强，采用透明质酸修饰羟基喜树碱，能够增加药物与细胞的结合，从而提高细胞摄取[WO2009074678A2]。