[发明专利]用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物及检测反应体系在审
| 申请号： | 201310186230.7 | 申请日： | 2013-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN103243095A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 李秀梅 | 申请（专利权）人： | 天津市动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津才智专利商标代理有限公司 12108 | 代理人： | 王晓红 |
| 地址： | 300402 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 杆菌 环介导 等温 扩增 引物 检测 反应 体系 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物，其特征在于，包含扩增布鲁杆菌保守基因omp25特异碱基序列的正向内引物FIP、正向外引物F3、反向内引物BIP、反向外引物B3，序列如下：
外引物：F3 5’-ATTGCCGGTTCGCAGATC-3’
B3 5’-GCGGAAATCCTGCGTGTC-3’
内引物：FIP 5’-TCAGCTTGGCTTCGAGACCGCTTAACAACGGCTTGGACGA-3’
BIP 5’-GGCCGCGTTGAGTACCGTTAAGCTTGTTGCGAACAGTCG-3’
所述引物与基因omp25的412-618bp位的核酸序列的一部分或其互补链互补。
2.采用如权利要求1所述的用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物的检测反应体系，其特征在于，25μL反应体系为：
外引物F3：5pmol·L-1、0.5μL
外引物B3：5pmol·L-1、0.5μL
内引物FIP：40pmol·L-1、0.5μL
内引物BIP：40pmol·L-1、0.5μL
Mg2+：100mM、2μL
甜菜碱：5M、4μL
dNTP混合液：10mM、3.5μL
不含Mg2+的10×buffer：2.5μL
Bst DNA聚合酶：8U·μL-1、1μL
模板：2μL
去离子水：8μL
反应温度为63℃。
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