[发明专利]猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒有效
| 申请号： | 201310181721.2 | 申请日： | 2013-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN103215389A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 余波;冉懋韬;谭诗文;史开志 | 申请（专利权）人： | 贵州省畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 李亮;程新敏 |
| 地址： | 550005*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 繁殖 呼吸 综合症 猪乙型 脑炎 双重 一步法 rt pcr 诊断 试剂盒 | ||
1.一种猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，其特征在于：包括100μL DL2000、20μL RT-PCR一步法酶、250μL 酶缓冲液、300μLRNase Free dH2O、80μL混合引物，各引物的浓度均为10μmol/L、20 μL阳性对照及 20μL阴性对照；混合引物包括PRRSV 上游引物、PRRSV 下游引物、JEV上游引物及JEV下游引物；PRRSV 上游引物的序列为：5’ –CGCCCAACAAAACCAGTCCAGA–3’，PRRSV 下游引物的序列为：5’–CAGTATATTGCTCGGCAAACT–3’；JEV上游引物的序列为：5’ –TCCTCGTCATAGGGATTTGCT–3’，JEV下游引物的序列为：5’ –AGGCCCAAGGCGTGAGGGCGG–3’。
2.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，其特征在于：阴性对照为超纯水。
3.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，其特征在于：阳性对照为标准猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎RNA RT-PCR产物。
4.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，其特征在于：所述的RT-PCR一步法酶由50%的甘油、3 mmol/μL的MgCl2，25mmol/μL的Tris-HCl及0.5μL 反转录酶组成。
5.根据权利要求1所述的猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，其特征在于：所述的酶缓冲液由3 mmol/μL的MgCl2，500pmol/μL的 dNTP 2.0μL，25mmol/μL的Tris-HCl组成。
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