[发明专利]快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法

权利要求书

1.一种快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、人乳腺癌MCF-7细胞的培养；

步骤二、实时荧光定量PCR获得待测内分泌干扰物剂量-效应曲线；

步骤三、将待测内分泌干扰物混合形成不同浓度配比的暴露液，同时设置含0.1％乙醇细胞培养液对照组，细胞持续暴露24h；

步骤四、暴露结束后，实时荧光定量PCR进行基因转录水平上分析；

步骤五、收集数据进行析因方差分析，绘制边际轮廓图，对待测内分泌干扰物作用机制及其复合效应进行评价；

所述待测内分泌干扰物为17β-雌二醇和o，p'-DDT。

2.根据权利要求1所述的快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法，其特征在于：步骤一中所述的培养是将MCF-7细胞用含10％胎牛血清的普通含酚红DMEM培养基在37℃、5％CO₂培养箱中培养。

3.根据权利要求1所述的快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法，其特征在于：步骤二中以17β-雌二醇为待测内分泌干扰物作剂量-效应曲线时，其剂量浓度范围设置为0.001pmol/L-10nmol/L；以o，p'DDT为待测内分泌干扰物作剂量-效应曲线时，其剂量浓度范围设置为0.01pmol/L-10μmol/L；同时设置含0.1％乙醇细胞培养液对照组，细胞持续暴露24h。

4.根据权利要求1所述的快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法，其特征在于：步骤三中所述混合形成不同浓度配比的暴露液是指，将17β-雌二醇的浓度设置为0.1pM、1pM和10pM三种，将o，p'-DDT的浓度设置为0.01nM、0.1nM和1nM三种，3×3交叉形成九种不同浓度配比的暴露液。