[发明专利]一种双敏感可崩解式纳米囊泡药物载体制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医用高分子材料领域，尤其是涉及一种基于聚乙二醇-聚赖氨酸的两亲性嵌段共聚物自组装的双敏感可崩解式纳米囊泡药物载体制剂及其制备方法。

背景技术

癌症(Cancer)，亦称恶性肿瘤(Malignant neoplasm)，由控制细胞生长增殖机制失常而引起的疾病。癌细胞除了生长失控外，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分，严重威胁着人类的健康。化学治疗是癌症治疗中最常用的一种方法，但是通过小分子药物直接递送方式面临诸多问题，如小分子药物半衰期短，为了达到治疗效果需要频繁给药，而小分子药物在体内分布无特异性靶向，对于正常组织的毒副作用大等，更重要的是化疗对于癌症患者无力挽救的原因之一是患者体内癌细胞对于小分子药物产生了耐药性，导致治疗效果大打折扣。

针对直接给药方式存在的严重不足，药物载体成为热点被广泛研究。其中备受关注的一类载体是由两亲性共聚物自组装而成的纳米粒子，这种纳米粒子中以胶束和囊泡居多。在自组装成胶束的过程中，两亲性聚合物的疏水链段形成胶束的内核，亲水链段形成胶束的外壳，形成核壳结构；而在自组装成囊泡的过程中，两亲性聚合物缠绕成膜围成一个中空的亲水的内腔结构。胶束的疏水内核可以负载疏水药物，囊泡的亲水内腔中可以负载亲水药物，疏水膜中可以负载疏水药物，在载体的包裹下可降低药物在传递的过程中的毒副作用。两亲性聚合物形成的纳米粒子的亲水性外壳可有效提高疏水性药物的水溶性，大大提高生物利用度。

聚乙二醇PEG是一种亲水性聚合物，具有优异的生物相容性、非免疫原性以及与血液成分相互作用小等优点，在聚合物和药物结合的领域里受到高度关注，是最常用的纳米粒子表面修饰聚合物。经过PEG修饰后的纳米粒子，可逃离网状内皮细胞的吞噬，提高体内长循环作用，并通过EPR作用富集于肿瘤部位。基于聚多肽的聚合物较传统合成高分子具有很多优势，良好的生物相容性以及可组装成稳定的有序的构象。合成的基于多肽的聚合物自组装为胶束或者囊泡等纳米粒子在药物和基因传递应用中有潜在的作用。

针对化疗过程中的耐药问题，用纳米粒子作为药物载体包裹药物来逃避耐药细胞的识别过程，渐渐成为逆转耐药行为的方法之一。

普通的两亲性聚合物自组装形成的纳米粒子并不能识别肿瘤部位与正常部位，也不能区分细胞内及细胞外的环境，因此研究能在肿瘤细脆内释放药物的具有敏感性的智能型聚合物纳米粒子作为药物载体具有重要意义。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种基于聚乙二醇-聚赖氨酸的两亲性嵌段共聚物自组装的双敏感可崩解式纳米囊泡药物载体制剂及其制备方法，在一定程度上逆转了化学治疗过程中产生的耐药性。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种双敏感可崩解式纳米囊泡药物载体制剂，该载体制剂为具有疏水双分子膜及亲水内腔的中空的纳米球体状囊泡；由双敏感两亲性嵌段共聚物利用溶剂交换法通过疏水作用自组装形成。

所述的疏水双分子膜负载疏水药物，所述的亲水内腔负载亲水药物。

所述的双敏感两亲性嵌段共聚物由还原敏感的二硫键及pH敏感的碳氮双键桥连亲水性聚乙二醇和疏水性苄氧羰基保护的聚赖氨酸而成；所述的还原敏感为谷胱甘肽(GSH)敏感。还原敏感由二硫键实现，pH敏感由碳氮双键实现。

所述的载体制剂的剂型为冻干粉针剂，所述的载体制剂的粒径范围为100-500纳米。

一种双敏感可崩解式纳米囊泡药物载体制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)ε-苄氧羰基保护赖氨酸(Z-Lys NCA)的制备；将三光气溶于无水四氢呋喃中，然后在氩气保护下逐滴加入到赖氨酸单体的无水四氢呋喃悬浊液中，搅拌加热到50℃，待溶液澄清时停止反应并自然冷却，用体积比为5∶1的正己烷/四氢呋喃重结晶2～3次，抽滤，常温真空干燥，得到Z-Lys NCA粉末；

(2)聚赖氨酸(以PzLL_n表示，其中n≥1)的制备：将乙胺盐酸盐和Z-Lys NCA溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，在氩气保护下进行开环聚合反应，先冰浴下反应5h，然后常温下继续反应72h，透析，冻干得到含n个链节的聚赖氨酸，其中n≥1，n值越大，链节越长，也即两亲性聚合物中的疏水链段越长；