[发明专利]一种胶原基硬脑膜及其制备方法

权利要求书

1.一种胶原基硬脑膜，包含以脱细胞猪真皮为基质的两层或两层以上结构，其中紧贴脑组织一侧为平均孔径在3μm及以下的胶原纤维，另一侧为平均孔径在20μm及以上的胶原纤维。

2.权利要求1所述的胶原基硬脑膜，其特征在于以离子液体/钠盐复合体系作为胶原的溶剂体系，经过静电纺丝、冷冻干燥以及灭菌处理步骤来制备。

3.权利要求2所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的离子液体/钠盐复合体系体系中的离子液体的阳离子结构选自1-乙基3-甲基咪唑（[Emim]）、1-丁基，3-甲基咪唑（[Bmim]）、1-烯丙基，3-甲基咪唑（[Amim]）中的一种或几种；离子液体的阴离子结构选自甲酸根（COO-）、乙酸根（CH₃COO^-）、苯甲酸根（Ba）、甘氨酸根（Gly）、磺酸根（SO₃^2-）、乳酸根（La）中的一种或几种；钠盐为硫酸钠（Na₂SO₄）、硫酸氢钠（NaHSO₄）、氯化钠（NaCl）、磷酸钠（Na₃PO₄）、磷酸氢二钠（Na₂HPO₄）、磷酸二氢钠（NaH₂PO₄）、硝酸钠（NaNO₃）、碳酸氢钠（NaHCO₃）、碳酸钠（Na₂CO₃）中的一种或几种，钠盐占离子液体体系的重量百分数含量为0.1～1%wt之间。

4.如权利要求1或2所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的胶原为从动物的皮肤、跟腱、尾腱、骨头或鳞片中所提取之I型胶原，其类型包括：牛跟腱I型胶原，鼠尾腱I型胶原，猪皮I型胶原，牛皮I型胶原，鱼皮I型胶原，驴皮I型胶原，鱼鳞I型胶原、牛骨I型胶原、猪骨I型胶原或其它市售I型胶原。

5.如权利要求2或3所述的胶原基硬脑膜，其特征在于，胶原占离子液体/Na盐复合溶剂体系的质量百分数范围为0.01% wt～20% wt。

6.如权利要求1-3任一所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的脱细胞猪真皮采用如下方式获得：将新鲜猪皮剖层为厚度为0.5～1.0mm的薄片，用质量浓度为3.0～5.0%的过氧乙酸超声波下超声处理1h～3h，进行病毒灭活，接着采用质量浓度为2～5%的活力单位为5万单位的胰蛋白酶，质量浓度为5～10%的平平加(AEO-25)进行脱细胞和脱脂处理，然后冻干并经过了电解质溶液的充分浸润，使其含水量为5% wt～100% wt。

7.如权利要求6所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的电解质溶液的组成成分为0.9%wt的氯化钠（NaCl），0.01Mol/L的磷酸盐缓冲溶液(PBS)，体积比范围NaCl：PBS为1:9～9:1。

8.如权利要求书2或3所述的胶原基硬脑膜，其特征在于在静电纺丝之后再使用洗脱液进行洗涤，以除去残留的溶剂，该洗脱液的特征在于其组成为去离子水、乙醇或去离子水与乙醇互配物，其中去离子水与乙醇的互配物体积比为1：9～9:1。

9.如权利要求书2或3所述的胶原基硬脑膜，其特征在于静电纺丝是以空气为介质进行静电纺丝，控制静电场电压在5～50 kv，喷丝孔直径在0.05～3mm，微量注射器注射速率为1～10 mL/h，滚筒收集器的转速为5～1000r/min，纺丝距离在10～50cm之间，环境湿度在10～70%之间。

10.如权利要求书2或3所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的冷冻干燥为阶段控制冷冻干燥工艺，具体参数如下：第一阶段温度-35 ℃，降温速率2 ℃/min，恒温4 h；第二阶段温度-25 ℃，升温速率1.5 ℃/min，恒温时间8 h；第三阶段温度-15 ℃，升温速率1.5 ℃/min，恒温时间10h；第四阶段温度-5 ℃，升温速率1.5 ℃/min，恒温时间8 h；第五阶段温度21 ℃，升温速率1.5 ℃/min，恒温时间6 h。

11.如权利要求书2或3所述的胶原基硬脑膜，其特征在于所述的灭菌处理为采用低温环氧乙烷灭菌或钴-60射线辐照灭菌，辐照剂量为30-60kGy。