[发明专利]一种测定低聚半乳糖平均聚合度的方法

权利要求书

1.一种测定低聚半乳糖平均聚合度的方法，其特征在于，包括：

1）取低聚半乳糖样品，用超纯水溶解后用微孔滤膜过滤，得到待测液；

2）使用钙型阳离子交换柱对所述待测液进行高效液相色谱法检测，并根据检测结果计算得到所述低聚半乳糖样品中半乳糖、葡萄糖、二糖、三糖、四糖和聚合度为5及以上的多糖的百分比含量；

3）使用氨基柱对所述待测液进行高效液相色谱法检测，并根据检测结果计算得到所述二糖中乳糖、半乳二糖和异乳糖的百分比含量；

4）由公式R₂=[（r_半+r_异）/（r_半+r_乳+r_异）]×r₂计算聚合度为2的低聚糖在总糖中的百分比含量，式中：

　　R₂为所述聚合度为2的低聚糖在总糖中的百分比含量；

　　r_半为所述半乳二糖在所述二糖中的百分比含量；

　　r_异为所述异乳糖在所述二糖中的百分比含量；

　　r_乳为所述乳糖在所述二糖中的百分比含量；

　　r₂为所述二糖在总糖中的百分比含量；

5) 由公式R_n=[r_n/（r₂+r₃+r₄+r₅）]×100计算不同聚合度的低聚半乳糖组分在总低聚半乳糖中的百分比含量，式中： 

　　R_n为聚合度为n的低聚半乳糖组分在总低聚半乳糖中的百分比含量；

　　r_n为聚合度为n的低聚半乳糖组分在总糖中的百分比含量；

　　r₂为聚合度为2的低聚半乳糖组分在总糖中的百分比含量；

　　r₃为聚合度为3的低聚半乳糖组分在总糖中的百分比含量；

　　r₄为聚合度为4的低聚半乳糖组分在总糖中的百分比含量；

　　r₅为聚合度为5的低聚半乳糖组分在总糖中的百分比含量；

6) 由公式n=（A₁×DP₁+ A₂×DP₂+···+ A_i×DP_i）/100计算所述低聚半乳糖样品中低聚半乳糖的平均聚合度，式中：

　　n为低聚半乳糖的平均聚合度；

　　A_i为组分i的百分比含量，%；

　　DP_i为组分i的聚合度。

2.如权利要求1所述的测定低聚半乳糖平均聚合度的方法，其中，所述使用钙型阳离子交换柱对所述待测液进行高效液相色谱法检测的条件为：色谱柱为CHO-620分析柱，规格为6.5×300mm；示差折光检测器；流动相为超纯水；色谱柱温度为80℃；流动相流量为0.5ml/min；检测器温度为50℃；进样量为20μL；在正式进样检测前，以超纯水作为流动相，以0.5mL/min流速稳定基线，当基线稳定后即可进样。

3.如权利要求1所述的测定低聚半乳糖平均聚合度的方法，其中，所述使用氨基柱对所述待测液进行高效液相色谱法检测的条件为：色谱柱为氨基柱，规格为4.6×250mm；示差折光检测器；流动相为乙腈∶超纯水=70∶30；色谱柱温度为35℃；流动相流量为1.0ml/min；检测器温度为40℃；进样量为20μL；在正式进样检测前，以超纯水作为流动相，以1.0mL/min流速稳定基线，当基线稳定后即可进样。