[发明专利]一种高产丙酸詹氏丙酸杆菌工程菌及其应用在审
| 申请号： | 201310170648.9 | 申请日： | 2013-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN104140942A | 公开（公告）日： | 2014-11-12 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;堵国成;刘龙;李江华;诸葛鑫 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/63;C12P7/52;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自刚;王玉松 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高产 丙酸 杆菌 工程 及其 应用 | ||
1.一种高产丙酸的詹氏丙酸杆菌工程菌，其特征是将克雷伯氏菌（Klebsiella pneumonia subsp.Pneumoniae）ATCC12657中甘油脱氢酶基因gldA克隆到詹氏丙酸杆菌CCTCC M NO:2013071构建而成的詹氏丙酸杆菌工程菌。
2.根据权利要求书1所述詹氏丙酸杆菌工程菌，其特征在于，所述甘油脱氢酶编码基因如NCBI-Gene ID:150953431所示。
3.根据权利要求2所述的詹氏丙酸杆菌工程菌，其特征在于，所述甘油脱氢酶编码基因位于表达载体pZGX04上。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述表达载体pZGX04是由野生质粒pZGX、NCBI编号为NCBI-Gene ID:JQ728013、pUC18、NCBI编号为NCBI-Gene ID:L08752以及氯霉素抗性基因NCBI编号为NCBI-Gene ID:NC_004774构建而成。
5.一种提高詹氏丙酸杆菌产丙酸的方法，其特征是采用权利要求1所述詹氏丙酸杆菌工程菌为出发菌株，将32°C在厌氧瓶中静置培养48h的种子以10%的接种量转入装有发酵培养基的发酵罐中，于32°C、200rpm条件下培养150h，间歇通氮气。
6.权利要求5所述的方法，其特征在于所述种子培养中种子培养基组成为：乳酸钠10g，酵母粉10g，trypticase soy broth10g，pH7.0，溶于1L水中。
7.权利要求5所述的方法，其特征在于所述发酵培养中发酵培养基组成为：酵母粉10g，trypticase soy broth5g，K2HPO42.5g，KH2PO41.5g,甘油30g，CoCl28mg，ZnSO48mg，MgSO48mg，pH7.0，溶于1L水中。
8.根据权利要求书5-7任一所述的方法，其特征在于詹氏丙酸杆菌工程菌的甘油脱氢酶比出发菌株提高了6.74倍，底物转化率、生产强度和产量分别提高了28.9%、33.3%和28%，分批发酵丙酸产量达到28.23g/L。
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