[发明专利]千层金再生体系建立的方法

权利要求书

1.一种千层金再生体系建立的方法，包括下列步骤：

（1）将外植体千层金无菌苗幼嫩叶片从叶柄处切下，接种到含有激素的MS愈伤组织诱导培养基中，培养12-15天；

（2）再在含有激素的MS愈伤组织继代培养基中培养25-30天；

（3）将愈伤组织接种至含有激素的MS分化培养基上进行分化培养；

（4）待不定芽长至2-3cm时，将其切下，接种至MS培养基里进行壮苗培养；

（5）待不定芽长至4-5cm时，将其接种至含有激素的MS生根培养基上进行生根培养；

（6）待不定芽根系长出后，将其炼苗移栽。

所述愈伤组织诱导培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；

所述愈伤组织继代培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；

所述分化培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6-苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；

所述生根培养基中的激素为0.1～1.0mg/L的吲哚丁酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其中1L MS培养基中包含：硝酸钾1900mg，硝酸铵1650mg，氯化钙440mg，硫酸镁370mg，磷酸二氢钾170mg，硫酸锰22.3mg，硫酸锌8.6mg，硼酸6.2mg，碘化钾0.83mg，钼酸钠0.25mg，乙二胺四乙酸二钠37.25mg，硫酸亚铁27.8mg，硫酸铜0.025mg，氯化钴0.025mg，肌醇100mg，烟酸0.5mg，盐酸硫胺素0.1mg，盐酸吡哆素0.5mg，甘氨酸2mg，pH值5.80。

3.根据权利要求1所述的方法，所述愈伤组织诱导培养基中的激素为0.01mg/L的噻重氮苯基脲和0.1mg/L的萘乙酸；所述愈伤组织继代培养基中的激素为0.01mg/L的噻重氮苯基脲和0.1mg/L的萘乙酸；所述分化培养基中的激素为0.02mg/L的噻重氮苯基脲和0.2mg/L的萘乙酸；所述生根培养基中的激素为0.2mg/L的吲哚丁酸。

4.根据权利要求1所述的方法，所述外植体在进行愈伤组织诱导之前，划出横向或纵向深至表皮的伤口。

5.根据权利要求1所述的方法，所述不定芽的炼苗时间为3～5天，移栽所用基质为营养土。

6.根据权利要求1所述的方法，所述培养的条件均为光照强度为2000lx，每日光照16小时，培养温度24－28℃。